OK
Cell line · Produktnummer 606465
The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...
Anpassning / Rekommendationer
- OKCell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
OK-cellinjen är en permanent epitelliknande cellkultur som härrör från njurvävnad från en vuxen amerikansk opossumhona (Didelphis virginiana). Cellinjen har etablerats in vitro och är känd för sitt icke-diploida kromosomtal på 23 och sin anpassningsförmåga till vävnadsodlingsförhållanden. Ursprungligen härrörde kulturen från blandade celltyper, men utvecklades till övervägande epitelceller efter åtta passager. OK-cellinjen har genomgått en omfattande karakterisering vad gäller morfologi, kromosomuppsättning och tillväxtdynamik, vilket gör den till en robust modell för cytogenetiska studier och studier av kromosomisolering.
En av de viktigaste egenskaperna hos OK-cellinjen är dess användbarhet i kromosomstudier, särskilt för isolering av X-kromosomen hos däggdjur. Opossums X-kromosom är betydligt mindre (cirka 30% mindre än de minsta autosomerna) och innehåller inte stora block av konstitutivt heterokromatin, vilket underlättar separationen från autosomer med tekniker som flödesmikrofluorometri och gradientcentrifugering. OK-cellernas stabila karyotyp, med förekomsten av en distinkt metacentrisk markörkromosom, ökar deras användbarhet i genomiska och kromosomala studier. Den faderliga X-kromosomens preferentiella inaktivering hos detta pungdjur utgör en jämförelsemodell för att studera mekanismer som ligger bakom X-kromosomens inaktivering hos däggdjur.
OK-cellerna har också visat motståndskraft och anpassningsförmåga under olika odlingsförhållanden, inklusive serumvariationer och olika mitoshämmande medel som Velban (vinblastinsulfat), som är särskilt effektivt för att uppnå höga mitosindex för kromosomisolering. Cellinjens förmåga att synkronisera och producera höga utbyten av metafasceller understryker ytterligare dess lämplighet för detaljerade kromosomanalyser, inklusive kvantifiering av DNA-innehåll och högupplöst avbildning av kromosomspridning.
- Vävnad
- Njure, cortex, proximala tubuli
- Synonymer
- Opossum Kidney
- OK-WT
02Klassificering
- Organism
- Opossum
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
04Identifierare
- Källa
- OK (Cytion katalognummer 606465)
- NCBI-skattenummer
- 9267
- Cellosaurus
- CVCL_0472
05Uttryck och mottaglighet
- Receptorer som uttrycks
- Alfa2-adrenerga, serotonin, bisköldkörtelhormon, natriuretisk faktor i förmaket
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- Vuxen
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Ansvarsfriskrivning
- Våra celler tillhandahålls uteslutande för in vitro-laboratorieforskning och är inte avsedda för klinisk eller diagnostisk användning, och de ska inte heller administreras till människor eller användas för veterinära ändamål. Användare måste följa alla tillämpliga riktlinjer och föreskrifter för hantering och användning av dessa celler i en forskningsmiljö.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja
.jpg)