OK

De OK-cellijn is een permanente epitheliale celcultuur afkomstig van nierweefsel van een volwassen vrouwelijke Amerikaanse opossum (Didelphis virginiana). Deze cellijn, die in vitro is gemaakt, valt op door zijn niet-diploïde chromosomale modale aantal van 23 en zijn aanpassingsvermogen aan weefselkweekomstandigheden. De kweek was aanvankelijk afgeleid van gemengde celtypen, maar evolueerde na acht passages naar voornamelijk epitheelcellen. De OK cellijn is uitgebreid gekarakteriseerd in termen van morfologie, chromosomale constitutie en groeidynamiek, waardoor het een robuust model is voor cytogenetische en chromosoomisolatiestudies.

Een van de belangrijkste eigenschappen van de OK cellijn is het nut ervan voor chromosoomstudies, met name voor het isoleren van het X-chromosoom van zoogdieren. Het X-chromosoom van de opossum is aanzienlijk kleiner (ongeveer 30% kleiner dan de kleinste autosomen) en bevat geen grote blokken constitutieve heterochromatine, waardoor scheiding van autosomen met technieken als flow microfluorometrie en gradiëntcentrifugatie gemakkelijker wordt. Het stabiele karyotype van de OK-cellen, met de aanwezigheid van een kenmerkend metacentrisch markerchromosoom, verbetert hun toepassing in genomische en chromosomale studies. De preferentiële inactivatie van het vaderlijke X-chromosoom in dit buideldier biedt een vergelijkend model voor het bestuderen van mechanismen die ten grondslag liggen aan X-chromosoom inactivatie bij zoogdieren.

OK-cellen hebben ook veerkracht en aanpassingsvermogen laten zien in verschillende kweekomstandigheden, waaronder serumvariaties en verschillende mitotisch remmende middelen zoals Velban (vinblastinesulfaat), dat bijzonder effectief is voor het bereiken van hoge mitotische indices voor chromosoomisolatie. Het vermogen van de cellijn om te synchroniseren en een hoge opbrengst aan metafasecellen te produceren, onderstreept de geschiktheid voor gedetailleerde chromosomale analyses, waaronder de kwantificering van het DNA-gehalte en beeldvorming met hoge resolutie van chromosomale spreidingen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring