OK
Cell line · Produktnummer 606465
The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...
Tilpasning / Anbefalinger
- OKCell line€430.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
OK-cellelinjen er en permanent epitellignende cellekultur som stammer fra nyrevev fra en voksen hunn av amerikansk opossum (Didelphis virginiana). Denne cellelinjen er etablert in vitro og er kjent for sitt ikke-diploide kromosomale modaltall på 23 og sin tilpasningsevne til vevskulturbetingelser. Opprinnelig stammer cellelinjen fra blandede celletyper, men etter åtte passeringer utviklet den seg til å bestå av epitelceller. OK-cellelinjen har blitt grundig karakterisert med hensyn til morfologi, kromosomkonstitusjon og vekstdynamikk, noe som gjør den til en robust modell for cytogenetiske og kromosomisolasjonsstudier.
En av de viktigste egenskapene til OK-cellelinjen er dens anvendelighet i kromosomstudier, spesielt når det gjelder isolering av X-kromosomet hos pattedyr. Opossums X-kromosom er betydelig mindre (ca. 30 % mindre enn de minste autosomene) og inneholder ikke store blokker med konstitutivt heterokromatin, noe som gjør det lettere å skille det fra autosomene ved hjelp av teknikker som flow-mikrofluorometri og gradientsentrifugering. OK-cellenes stabile karyotype, med tilstedeværelsen av et karakteristisk metacentrisk markørkromosom, gjør det lettere å bruke dem i genomiske og kromosomale studier. Faderens X-kromosom inaktiveres fortrinnsvis hos dette pungdyret, noe som gir en komparativ modell for å studere mekanismene som ligger til grunn for inaktivering av X-kromosomet hos pattedyr.
OK-cellene har også vist seg robuste og tilpasningsdyktige under ulike dyrkingsforhold, inkludert serumvariasjoner og ulike mitosehemmende midler som Velban (vinblastinsulfat), som er spesielt effektivt for å oppnå høye mitoseindekser for kromosomisolering. Cellelinjens evne til å synkronisere og produsere høye utbytter av metafaseceller understreker ytterligere dens egnethet for detaljerte kromosomanalyser, inkludert kvantifisering av DNA-innhold og høyoppløselig avbildning av kromosomspredning.
- Vev
- Nyre, cortex, proksimale tubuli
- Synonymer
- Opossum Kidney
- OK-WT
02Klassifisering
- Organisme
- Opossum
- Sex
- Kvinne
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitel-lignende
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- OK (Cytion-katalognummer 606465)
- NCBI-skattenummer
- 9267
- Cellosaurus
- CVCL_0472
05Uttrykk og mottakelighet
- Reseptorer som uttrykkes
- Alfa2-adrenerge, serotonin, biskjoldbruskkjertelhormon, atriell natriuretisk faktor
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Donorens alder
- Voksen
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Ansvarsfraskrivelse
- Cellene våre leveres utelukkende til in vitro-laboratorieforskningsformål og er ikke ment for klinisk eller diagnostisk bruk, og de skal heller ikke administreres til mennesker eller brukes til veterinærformål. Brukere må overholde alle gjeldende retningslinjer og forskrifter for håndtering og bruk av disse cellene i forskningssammenheng.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja
.jpg)