OK

La linea cellulare OK è una coltura cellulare epiteliale permanente derivata dal tessuto renale di una femmina adulta di opossum americano (Didelphis virginiana). Stabilita in vitro, questa linea cellulare si distingue per il numero cromosomico modale non diploide di 23 e per la sua adattabilità alle condizioni di coltura dei tessuti. Inizialmente derivata da tipi di cellule miste, la coltura si è evoluta in cellule prevalentemente epiteliali dopo otto passaggi. La linea cellulare OK è stata ampiamente caratterizzata in termini di morfologia, costituzione cromosomica e dinamiche di crescita, rendendola un modello robusto per studi citogenetici e di isolamento cromosomico.

Una delle caratteristiche principali della linea cellulare OK è la sua utilità negli studi cromosomici, in particolare per l'isolamento del cromosoma X dei mammiferi. Il cromosoma X dell'opossum è significativamente più piccolo (circa il 30% in meno rispetto agli autosomi più piccoli) e non contiene grandi blocchi di eterocromatina costitutiva, facilitando la separazione dagli autosomi attraverso tecniche come la microfluorometria a flusso e la centrifugazione a gradiente. Il cariotipo stabile delle cellule OK, con la presenza di un cromosoma marcatore metacentrico distintivo, ne migliora l'applicazione negli studi genomici e cromosomici. L'inattivazione preferenziale del cromosoma X paterno in questo marsupiale fornisce un modello comparativo per studiare i meccanismi alla base dell'inattivazione del cromosoma X nei mammiferi.

Le cellule OK hanno inoltre dimostrato resilienza e adattabilità a diverse condizioni di coltura, tra cui variazioni di siero e diversi agenti di arresto mitotico come il Velban (vinblastina solfato), particolarmente efficace per ottenere elevati indici mitotici per l'isolamento dei cromosomi. La capacità della linea cellulare di sincronizzarsi e produrre elevate rese di cellule in metafase sottolinea ulteriormente la sua idoneità per analisi cromosomiche dettagliate, tra cui la quantificazione del contenuto di DNA e l'imaging ad alta risoluzione della diffusione cromosomica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia