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OK
ティッシュ
腎臓、皮質、近位尿細管
同義語
Opossum Kidney, OK-WT

OK

Cell line · 製品番号 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

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01概要

説明

OK細胞株は、アメリカオポッサム(Didelphis virginiana)の雌成体の腎臓組織由来の永久上皮様細胞培養である。試験管内で樹立されたこの細胞株は、非二倍体の染色体様式数23であることと、組織培養条件への適応性で注目されている。当初は混合型細胞由来であったが、8回の継代培養の後、上皮細胞主体へと進化した。OK細胞株は、形態、染色体構成、増殖動態の点で広範囲に特性化されており、細胞遺伝学的研究および染色体分離研究のための強固なモデルとなっている。

OK細胞株の重要な特徴の一つは、染色体研究、特に哺乳類X染色体の単離に有用であることである。オポッサムのX染色体は著しく小さく(最小の常染色体より約30%小さい)、構成的ヘテロクロマチンの大きなブロックを含まないため、フローマイクロフルオロメトリーや勾配遠心分離のような技術による常染色体からの分離が容易である。OK細胞の安定した核型は、特徴的なメタセントリックマーカー染色体の存在とともに、ゲノムおよび染色体研究への応用を高めている。この有袋類における父方のX染色体の優先的不活性化は、哺乳類におけるX染色体不活性化の基礎となるメカニズムを研究するための比較モデルとなる。

OK細胞はまた、血清の変化やベルバン(硫酸ビンブラスチン)のような様々な有糸分裂阻止剤を含む様々な培養条件に対して回復力と適応性を示し、特に染色体分離のために高い有糸分裂指標を達成するのに有効である。この細胞株の同調能とメタフェース細胞の高収率生産能は、DNA含量の定量や染色体の広がりの高解像度イメージングを含む詳細な染色体分析に適していることをさらに強調している。

ティッシュ
腎臓、皮質、近位尿細管
同義語
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02分類

生物
オポッサム
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様

04識別子

引用
OK(サイシオン カタログ番号 606465)
NCBI 納税者番号
9267
セロサウルス
CVCL_0472

05発現と感受性

発現している受容体
α2アドレナリン、セロトニン、副甲状腺ホルモン、心房性ナトリウム利尿因子

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
アダルト