Skip to content
OK
Tissue
כליה, קליפת המוח, אבובית פרוקסימלית
Synonyms
Opossum Kidney, OK-WT

Documents

OK

Cell line · Product number 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים OK הוא תרבות תאים קבועה דמוית אפיתל, שמקורה ברקמת כליה של נקבת אופוסום אמריקאי בוגרת (Didelphis virginiana). קו תאים זה, שהוקם במבחנה, בולט במספר הכרומוזומים הלא-דיפלואידי המודאלי שלו, העומד על 23, ובכושר ההסתגלות שלו לתנאי תרבות רקמות. התרבות, שמקורה בתחילה בסוגים מעורבים של תאים, התפתחה לתאים אפיתלליים בעיקר לאחר שמונה מעברים. קו התאים OK אופיין בהרחבה מבחינת מורפולוגיה, הרכב כרומוזומלי ודינמיקת גדילה, מה שהופך אותו למודל חזק למחקרים ציטוגנטיים ומחקרים על בידוד כרומוזומים.

אחת התכונות העיקריות של קו התאים OK היא השימושיות שלו במחקרים כרומוזומליים, במיוחד לבידוד כרומוזום X של יונקים. כרומוזום X של האופוסום קטן משמעותית (כ-30% קטן יותר מהאוטוזומים הקטנים ביותר) ואינו מכיל בלוקים גדולים של הטרוכרומטין קונסטיטטיבי, מה שמקל על ההפרדה מהאוטוזומים באמצעות טכניקות כמו מיקרו-פלואורומטריה זרימה וצנטריפוגה גרדיאנטית. הקריוטיפ היציב של תאי OK, עם נוכחות של כרומוזום סמן מטצנטרי ייחודי, משפר את יישומם במחקרים גנומיים וכרומוזומליים. ההשבתה המועדפת של כרומוזום X האבהי בכיסאי זה מספקת מודל השוואתי לחקר המנגנונים העומדים בבסיס השבתת כרומוזום X ביונקים.

תאי OK גם הפגינו עמידות ויכולת הסתגלות בתנאי תרבית שונים, כולל שינויים בסרום וסוכנים שונים לעיכוב מיטוזה כמו Velban (vinblastine sulfate), שהוא יעיל במיוחד להשגת מדדי מיטוזה גבוהים לבידוד כרומוזומים. היכולת של קו התאים לסנכרן ולייצר תשואות גבוהות של תאי מטאפזה מדגישה עוד יותר את התאמתו לניתוחים כרומוזומליים מפורטים, כולל כימות תוכן DNA והדמיה ברזולוציה גבוהה של התפשטות כרומוזומלית.

Tissue
כליה, קליפת המוח, אבובית פרוקסימלית
Synonyms
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02Classification

Organism
Opossum
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
OK (מספר קטלוגי Cytion 606465)
NCBI TaxID
9267
Cellosaurus
CVCL_0472

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
אלפא-2-אדרנרגי, סרוטונין, הורמון יותרת התריס, גורם נטריורטי אטריאלי

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
מבוגר