Prejsť na obsah
OK
Tkanivo
Obličky, kôra, proximálny tubulus
Synonymá
Opossum Kidney, OK-WT

Dokumenty

OK

Cell line · Číslo výrobku 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia OK je trvalá epitelová bunková kultúra odvodená z obličkového tkaniva dospelej samice vačice americkej (Didelphis virginiana). Táto bunková línia, vytvorená in vitro, sa vyznačuje nediploidným chromozómovým modálnym číslom 23 a prispôsobivosťou podmienkam tkanivovej kultúry. Kultúra pôvodne odvodená zo zmiešaných typov buniek sa po ôsmich pasážach vyvinula na prevažne epitelové bunky. Bunková línia OK bola podrobne charakterizovaná z hľadiska morfológie, chromozómovej konštitúcie a dynamiky rastu, čo z nej robí spoľahlivý model pre cytogenetické štúdie a štúdie izolácie chromozómov.

Jednou z kľúčových vlastností bunkovej línie OK je jej využiteľnosť v chromozómových štúdiách, najmä na izoláciu chromozómu X cicavcov. Opossum X chromozóm je výrazne menší (približne o 30 % menší ako najmenšie autozómy) a neobsahuje veľké bloky konštitutívneho heterochromatínu, čo uľahčuje separáciu od autozómov pomocou techník, ako je prietoková mikrofluorometria a gradientová centrifugácia. Stabilný karyotyp OK buniek s prítomnosťou charakteristického metacentrického markerového chromozómu zlepšuje ich použitie v genomických a chromozomálnych štúdiách. Preferenčná inaktivácia otcovského chromozómu X u tohto vačkovca poskytuje porovnávací model na štúdium mechanizmov, ktoré sú základom inaktivácie chromozómu X u cicavcov.

OK bunky tiež preukázali odolnosť a prispôsobivosť v rôznych kultivačných podmienkach vrátane variácií séra a rôznych mitotických látok, ako je Velban (vinblastín sulfát), ktorý je obzvlášť účinný na dosiahnutie vysokých mitotických indexov na izoláciu chromozómov. Schopnosť bunkovej línie synchronizovať sa a produkovať vysoké výťažky metafázových buniek ďalej zdôrazňuje jej vhodnosť na podrobné chromozomálne analýzy vrátane kvantifikácie obsahu DNA a zobrazovania chromozomálnych nánosov s vysokým rozlíšením.

Tkanivo
Obličky, kôra, proximálny tubulus
Synonymá
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02Klasifikácia

Organizmus
Vačica
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
OK (katalógové číslo Cytion 606465)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9267
Cellosaurus
CVCL_0472

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Alfa2-adrenergný, serotonín, parathormón, atriálny natriuretický faktor

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Dospelí