OK
Cell line · Product number 606465
The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...
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01General information
- Description
OK 細胞系是一種源自成年雌性美洲負鼠(Didelphis virginiana)腎臟組織的永久性上皮樣細胞培養物。該細胞系於體外建立,其顯著特徵在於非二倍體的模數染色體數為 23,且能適應組織培養條件。 該細胞系最初源自混合細胞類型,經過八次傳代後,培養物逐漸演變為以上皮細胞為主的細胞群。OK 細胞系在形態、染色體構成及生長動力學方面均已進行廣泛的特性分析,使其成為細胞遺傳學及染色體分離研究的可靠模型。
OK細胞系的一大關鍵特徵在於其在染色體研究中的應用價值,特別是用於分離哺乳動物的X染色體。 負鼠的 X 染色體明顯較小(比最小的常染色體小約 30%),且不含大塊的構成性異染色質,這使得透過流式微螢光測量法和梯度離心等技術,能輕鬆地將其與常染色體分離。 OK 細胞具有穩定的核型,並含有一條獨特的中著絲點標記染色體,這增強了其在基因組與染色體研究中的應用價值。此有袋類動物中父源 X 染色體的優先失活現象,為研究哺乳動物 X 染色體失活的機制提供了比較模型。
OK 細胞在各種培養條件下也展現出強韌性和適應性,包括血清濃度的變化,以及各種有絲分裂阻滯劑(如 Velban(硫酸長春鹼)),後者對於達成高有絲分裂指數以進行染色體分離特別有效。 該細胞系具有同步化及高產率產生中期細胞的能力,進一步凸顯其適用於詳細的染色體分析,包括DNA含量定量及染色體展片的高解析度成像。
- Tissue
- 腎臟、腎皮質、近端小管
- Synonyms
- Opossum Kidney
- OK-WT
02Classification
- Organism
- Opossum
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
04Identifiers
- Citation
- OK(Cytion 型號 606465)
- NCBI TaxID
- 9267
- Cellosaurus
- CVCL_0472
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- α2-腎上腺素能受體、血清素、甲狀旁腺激素、心房鈉尿因子
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 成人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Disclaimer
- 本產品所提供的細胞僅供體外實驗室研究之用,不得用於臨床或診斷用途,亦不得施予人類或用於獸醫用途。使用者必須遵守所有適用於研究環境中處理及使用這些細胞的相關指引與法規。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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