OK

Die OK-Zelllinie ist eine permanente epithelähnliche Zellkultur, die aus dem Nierengewebe eines erwachsenen weiblichen amerikanischen Opossums (Didelphis virginiana) gewonnen wird. Diese in vitro hergestellte Zelllinie zeichnet sich durch ihre nicht-diploide Chromosomenzahl von 23 und ihre Anpassungsfähigkeit an Gewebekulturbedingungen aus. Ursprünglich aus gemischten Zelltypen hervorgegangen, entwickelte sich die Kultur nach acht Passagen zu überwiegend epithelialen Zellen. Die OK-Zelllinie wurde hinsichtlich ihrer Morphologie, chromosomalen Konstitution und Wachstumsdynamik umfassend charakterisiert, was sie zu einem robusten Modell für zytogenetische und chromosomale Isolierungsstudien macht.

Eine der wichtigsten Eigenschaften der OK-Zelllinie ist ihre Nützlichkeit für Chromosomenstudien, insbesondere für die Isolierung des X-Chromosoms von Säugetieren. Das X-Chromosom des Opossums ist deutlich kleiner (etwa 30 % kleiner als die kleinsten Autosomen) und enthält keine großen Blöcke konstitutiven Heterochromatins, was die Trennung von Autosomen durch Techniken wie Durchflussmikrofluorometrie und Gradientenzentrifugation erleichtert. Der stabile Karyotyp der OK-Zellen mit dem Vorhandensein eines ausgeprägten metazentrischen Markerchromosoms begünstigt ihre Verwendung in genomischen und chromosomalen Studien. Die bevorzugte Inaktivierung des väterlichen X-Chromosoms bei diesem Beuteltier bietet ein Vergleichsmodell für die Untersuchung der Mechanismen, die der Inaktivierung des X-Chromosoms bei Säugetieren zugrunde liegen.

Die OK-Zellen haben sich auch als widerstandsfähig und anpassungsfähig gegenüber verschiedenen Kulturbedingungen erwiesen, einschließlich Serumvariationen und verschiedenen mitotischen Hemmstoffen wie Velban (Vinblastinsulfat), das besonders wirksam ist, um hohe mitotische Indizes für die Chromosomenisolierung zu erreichen. Die Fähigkeit der Zelllinie, sich zu synchronisieren und eine hohe Ausbeute an Metaphase-Zellen zu produzieren, unterstreicht ihre Eignung für detaillierte Chromosomenanalysen, einschließlich der Quantifizierung des DNA-Gehalts und der hochauflösenden Darstellung von Chromosomenverteilungen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung