Μετάβαση στο περιεχόμενο
OK
Ιστός
Νεφρός, φλοιός, εγγύς σωληνάριο
Συνώνυμα
Opossum Kidney, OK-WT

Έγγραφα

OK

Cell line · Αριθμός προϊόντος 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά ΟΚ είναι μια μόνιμη καλλιέργεια κυττάρων που μοιάζουν με επιθήλια και προέρχονται από νεφρικό ιστό ενήλικου θηλυκού αμερικανικού οπόσουμ (Didelphis virginiana). Η εν λόγω κυτταρική σειρά, η οποία δημιουργήθηκε in vitro, είναι αξιοσημείωτη για τον μη διπλοειδή χρωμοσωμικό αριθμό 23 και την προσαρμοστικότητά της σε συνθήκες καλλιέργειας ιστών. Αρχικά προερχόμενη από μικτούς κυτταρικούς τύπους, η καλλιέργεια εξελίχθηκε σε κυρίως επιθηλιακά κύτταρα μετά από οκτώ περάσματα. Η κυτταρική σειρά OK έχει χαρακτηριστεί εκτενώς από άποψη μορφολογίας, χρωμοσωμικής σύστασης και δυναμικής ανάπτυξης, καθιστώντας την ένα ισχυρό μοντέλο για μελέτες κυτταρογενετικής και απομόνωσης χρωμοσωμάτων.

Ένα από τα βασικά χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς ΟΚ είναι η χρησιμότητά της σε μελέτες χρωμοσωμάτων, ιδίως για την απομόνωση του χρωμοσώματος Χ των θηλαστικών. Το χρωμόσωμα Χ του οπόσουμ είναι σημαντικά μικρότερο (περίπου 30% μικρότερο από τα μικρότερα αυτοσώματα) και δεν περιέχει μεγάλα μπλοκ συστατικής ετεροχρωματίνης, διευκολύνοντας τον διαχωρισμό από τα αυτοσώματα μέσω τεχνικών όπως η μικροφθορομετρία ροής και η φυγοκέντρηση με κλίση. Ο σταθερός καρυότυπος των κυττάρων ΟΚ, με την παρουσία ενός χαρακτηριστικού μετακεντρικού χρωμοσώματος-δείκτη, ενισχύει την εφαρμογή τους σε γονιδιωματικές και χρωμοσωμικές μελέτες. Η προτιμησιακή αδρανοποίηση του πατρικού χρωμοσώματος Χ σε αυτό το μαρσιποφόρο παρέχει ένα συγκριτικό μοντέλο για τη μελέτη των μηχανισμών που διέπουν την αδρανοποίηση του χρωμοσώματος Χ στα θηλαστικά.

Τα κύτταρα ΟΚ έχουν επίσης επιδείξει ανθεκτικότητα και προσαρμοστικότητα σε διάφορες συνθήκες καλλιέργειας, συμπεριλαμβανομένων παραλλαγών του ορού και διαφορετικών παραγόντων που αναστέλλουν τη μίτωση, όπως το Velban (θειική βινβλαστίνη), το οποίο είναι ιδιαίτερα αποτελεσματικό για την επίτευξη υψηλών μιτωτικών δεικτών για την απομόνωση χρωμοσωμάτων. Η ικανότητα της κυτταρικής σειράς να συγχρονίζεται και να παράγει υψηλές αποδόσεις μεταφασικών κυττάρων υπογραμμίζει περαιτέρω την καταλληλότητά της για λεπτομερείς χρωμοσωμικές αναλύσεις, συμπεριλαμβανομένης της ποσοτικοποίησης της περιεκτικότητας σε DNA και της απεικόνισης υψηλής ανάλυσης των χρωμοσωμικών διασπορών.

Ιστός
Νεφρός, φλοιός, εγγύς σωληνάριο
Συνώνυμα
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Οπόσουμ
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
OK (αριθμός καταλόγου Cytion 606465)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9267
Κελλοσαύρος
CVCL_0472

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
Άλφα2-αδρενεργικό, σεροτονίνη, παραθυρεοειδής ορμόνη, κολπικός νατριουρητικός παράγοντας

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων