OK

Az OK sejtvonal egy felnőtt nőstény amerikai oposszum (Didelphis virginiana) veseszövetéből származó állandó epithelszerű sejtkultúra. Ez az in vitro létrehozott sejtvonal a 23-as nem-diploid kromoszóma-modális számával és a szövettenyésztési körülményekhez való alkalmazkodóképességével tűnik ki. A kezdetben vegyes sejttípusokból származó kultúra nyolc passzázs után túlnyomórészt epithelsejtekké alakult. Az OK sejtvonalat morfológia, kromoszóma-összetétel és növekedési dinamika szempontjából széleskörűen jellemezték, ami a citogenetikai és kromoszómaizolációs vizsgálatok robusztus modelljévé teszi.

Az OK-sejtvonal egyik legfontosabb jellemzője a kromoszóma-vizsgálatokban való hasznossága, különösen az emlős X-kromoszóma izolálásában. Az oposszum X-kromoszóma jelentősen kisebb (körülbelül 30%-kal kisebb, mint a legkisebb autoszómák), és nem tartalmaz nagy blokkokat konstitutív heterokromatinból, ami megkönnyíti az autoszómáktól való elválasztást olyan technikákkal, mint az áramlási mikrofluorometria és a gradiens centrifugálás. Az OK sejtek stabil kariotípusa, a jellegzetes metacentrikus markerkromoszóma jelenlétével fokozza alkalmazásukat a genomikai és kromoszómakutatásokban. Az apai X-kromoszóma preferenciális inaktiválódása ebben az erszényesben összehasonlító modellt nyújt az emlősök X-kromoszóma inaktiválódásának hátterében álló mechanizmusok tanulmányozásához.

Az OK sejtek emellett ellenállónak és alkalmazkodóképesnek bizonyultak különböző tenyésztési körülmények között, beleértve a szérumváltozásokat és különböző mitotikus megállító szereket, mint például a Velban (vinblasztin-szulfát), amely különösen hatékony a kromoszómaizoláláshoz szükséges magas mitotikus indexek eléréséhez. A sejtvonal szinkronizációs képessége és a metafázisú sejtek nagy hozamának előállítása tovább hangsúlyozza alkalmasságát részletes kromoszómaelemzésekre, beleértve a DNS-tartalom mennyiségi meghatározását és a kromoszómaeloszlás nagy felbontású képalkotását.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban