İçeriğe atla
OK
Doku
Böbrek, korteks, Proksimal tübül
Eş anlamlılar
Opossum Kidney, OK-WT

OK

Cell line · Ürün numarası 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

OK hücre hattı, yetişkin bir dişi Amerikan opossumunun (Didelphis virginiana) böbrek dokusundan elde edilen kalıcı epitel benzeri bir hücre kültürüdür. İn vitro olarak oluşturulan bu hücre hattı, 23 olan diploid olmayan kromozomal modal sayısı ve doku kültürü koşullarına uyarlanabilirliği ile dikkat çekmektedir. Başlangıçta karışık hücre tiplerinden türetilen kültür, sekiz pasajdan sonra ağırlıklı olarak epitelyal hücrelere dönüşmüştür. OK hücre hattı morfoloji, kromozomal yapı ve büyüme dinamikleri açısından kapsamlı bir şekilde karakterize edilmiştir ve bu da onu sitogenetik ve kromozom izolasyon çalışmaları için sağlam bir model haline getirmiştir.

OK hücre hattının en önemli özelliklerinden biri, kromozom çalışmalarında, özellikle de memeli X kromozomunun izolasyonunda kullanılabilmesidir. Opossum X kromozomu önemli ölçüde daha küçüktür (en küçük otozomlardan yaklaşık %30 daha küçüktür) ve büyük kurucu heterokromatin blokları içermez, bu da akış mikroflorometrisi ve gradyan santrifüjleme gibi tekniklerle otozomlardan ayrılmayı kolaylaştırır. OK hücrelerinin kararlı karyotipi ve ayırt edici bir metasentrik marker kromozomun varlığı, genomik ve kromozomal çalışmalarda kullanımlarını artırmaktadır. Bu keseli hayvanda paternal X kromozomunun tercihli inaktivasyonu, memelilerde X kromozomu inaktivasyonunun altında yatan mekanizmaları incelemek için karşılaştırmalı bir model sağlar.

OK hücreleri ayrıca serum varyasyonları ve kromozom izolasyonu için yüksek mitotik indeksler elde etmek için özellikle etkili olan Velban (vinblastin sülfat) gibi farklı mitotik tutuklayıcı ajanlar da dahil olmak üzere çeşitli kültür koşullarında esneklik ve uyarlanabilirlik göstermiştir. Hücre hattının senkronize olma ve yüksek verimle metafaz hücreleri üretme kabiliyeti, DNA içeriği ölçümü ve kromozomal yayılmaların yüksek çözünürlüklü görüntülenmesi de dahil olmak üzere ayrıntılı kromozomal analizler için uygunluğunun altını çizmektedir.

Doku
Böbrek, korteks, Proksimal tübül
Eş anlamlılar
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02Sınıflandırma

Canlı
Opossum
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
OK (Cytion katalog numarası 606465)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9267
Cellosaurus
CVCL_0472

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Alfa2-adrenerjik, serotonin, paratiroid hormonu, atriyal natriüretik faktör

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yetişkin