الانتقال إلى المحتوى
OK
الأنسجة
الكلية، القشرة، الأنبوبة القريبة من الكلية
المرادفات
Opossum Kidney, OK-WT

المستندات

OK

Cell line · رقم المنتج 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط الخلية OK هو عبارة عن مزرعة خلايا دائمة شبيهة بالظهارة مشتقة من نسيج كلية لأنثى أبوسوم أمريكية بالغة (ديدلفيس فيرجينيانا). تم إنشاء هذا الخط الخلوي في المختبر، ويتميز هذا الخط الخلوي بالعدد الصبغي غير ثنائي الصبغيات الذي يبلغ 23 صبغيًا وقدرته على التكيف مع ظروف زراعة الأنسجة. تم اشتقاقه في البداية من أنواع خلايا مختلطة، ثم تطورت المزرعة إلى خلايا طلائية في الغالب بعد ثمانية ممرات. وقد تم توصيف خط خلايا OK على نطاق واسع من حيث المورفولوجيا والتكوين الكروموسومي وديناميكيات النمو، مما يجعله نموذجًا قويًا لدراسات العزل الخلوي والخلوي الوراثي والكروموسومي.

تتمثل إحدى السمات الرئيسية لخط الخلية OK في فائدته في دراسات الكروموسوم، خاصةً لعزل كروموسوم X للثدييات. إن كروموسوم الأبوسوم X أصغر بكثير (أصغر بنسبة 30% تقريباً من أصغر الكروموسومات الذاتية) ولا يحتوي على كتل كبيرة من الكروموسومات المتغايرة التأسيسية، مما يسهل فصله عن الكروموسومات الذاتية من خلال تقنيات مثل قياس التدفق المجهري والطرد المركزي المتدرج. ويعزز النمط النووي المستقر للخلايا السليمة مع وجود كروموسوم علامة ميتروسوم متري مميز من تطبيقها في الدراسات الجينومية والكروموسومية. ويوفر التعطيل التفضيلي للكروموسوم X الأبوي في هذه الجرابيات نموذجاً مقارناً لدراسة الآليات الكامنة وراء تعطيل الكروموسوم X في الثدييات.

كما أظهرت خلايا OK أيضًا مرونة وقدرة على التكيف في ظروف الاستزراع المختلفة، بما في ذلك اختلافات المصل والعوامل المختلفة المثبطة للانقسام مثل فيلبان (كبريتات الفينبلاستين)، وهو فعال بشكل خاص لتحقيق مؤشرات انقسامية عالية لعزل الكروموسوم. وتؤكد قدرة خط الخلية على المزامنة وإنتاج غلة عالية من خلايا الطور الميتافيزيقي على ملاءمتها لإجراء تحليلات كروموسومية مفصلة، بما في ذلك تحديد كمية محتوى الحمض النووي والتصوير عالي الدقة لانتشار الكروموسومات.

الأنسجة
الكلية، القشرة، الأنبوبة القريبة من الكلية
المرادفات
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02التصنيف

كائن حي
الأبوسوم
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
موافق (كتالوج سايتون رقم 606465)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9267
سيلوصور
CVCL_0472

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
ألفا2-الأدرينالية والسيروتونين وهرمون الغدة الجار درقية والعامل الأذيني المدر للبول

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
للبالغين