OK
Cell line · Номер товару 606465
The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...
Налаштування / Рекомендації
- OKCell line€430.00
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
01Загальна інформація
- Опис
Клітинна лінія OK - це постійна епітеліоподібна культура клітин, отримана з тканини нирок дорослої самки американського опосума (Didelphis virginiana). Створена in vitro, ця клітинна лінія вирізняється своїм не диплоїдним хромосомним модальним числом 23 і пристосованістю до умов культивування тканин. Спочатку отримана зі змішаних типів клітин, культура еволюціонувала в переважно епітеліальні клітини після восьми пасажів. Клітинна лінія OK була детально охарактеризована з точки зору морфології, хромосомного складу та динаміки росту, що робить її надійною моделлю для цитогенетичних досліджень та досліджень з виділення хромосом.
Однією з ключових особливостей клітинної лінії OK є її корисність у хромосомних дослідженнях, особливо для виділення Х-хромосоми ссавців. Х-хромосома опосума значно менша (приблизно на 30% менша за найменші аутосоми) і не містить великих блоків конститутивного гетерохроматину, що полегшує її відокремлення від аутосом за допомогою таких методів, як проточна мікрофлуориметрія та градієнтне центрифугування. Стабільний каріотип ОК-клітин з наявністю характерної метацентричної маркерної хромосоми розширює можливості їх застосування в геномних і хромосомних дослідженнях. Переважна інактивація батьківської Х-хромосоми у цього сумчастого є порівняльною моделлю для вивчення механізмів, що лежать в основі інактивації Х-хромосоми у ссавців.
Клітини OK також продемонстрували стійкість та адаптивність до різних умов культивування, включаючи варіації сироватки крові та різні агенти, що зупиняють мітоз, такі як Велбан (вінбластин сульфат), який є особливо ефективним для досягнення високих мітотичних індексів для виділення хромосом. Здатність клітинної лінії синхронізуватися і давати високий вихід метафазних клітин ще раз підкреслює її придатність для детального хромосомного аналізу, включаючи кількісне визначення вмісту ДНК і візуалізацію хромосомних розширень з високою роздільною здатністю.
- Тканина
- Нирка, кора, проксимальні канальці
- Синоніми
- Opossum Kidney
- OK-WT
02Класифікація
- Організм
- Опосум
- Секс
- Жінка
- Характеристики росту
- Прихильник
- Рівень біобезпеки
- 1
03Характеристики
- Морфологія
- Епітеліальноподібні
04Ідентифікатори
- Посилання
- OK (код за каталогом 606465)
- Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
- 9267
- Целозавр
- CVCL_0472
05Експресія та сприйнятливість
- Рецептори, що експресуються
- Альфа2-адренергічні, серотонін, паратиреоїдний гормон, передсердний натрійуретичний фактор
06Обробка та вирощування
- Живильне середовище
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
- Атмосфера інкубації
37°C, 5% CO2, волога атмосфера.
- Добавки
- Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
- Реагент для дисоціації
- Аккутаза
- Пересадка в нове середовище
- Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
- Оновлення рідини
- 2-3 рази на тиждень
- Розморожування та культивування
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контроль якості та кріоконсервація
- Стерильність
Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.
Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.
- Середовище для заморожування
- Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
- Умови зберігання
Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.
- Умови доставки
Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.
08Донор
- Вік донора
- Дорослий
09Правові питання та безпека
- Заходи безпеки
- Плануючи зберігати кріовіал у рідкому азоті для подальшого розморожування, обов'язково слід дотримуватися суворих заходів безпеки. Під час перенесення заморожених зразків до резервуара з рідким азотом або з нього необхідно використовувати захисні рукавички та одяг, а також маску або захисні окуляри. Це необхідно для того, щоб зменшити ризик травмування від потенційних кріогенних вибухів при вилученні, які можуть призвести до розльоту гострих осколків.
- Застереження
- Наші клітини призначені виключно для лабораторних досліджень in vitro і не призначені для клінічного або діагностичного використання, а також не можуть бути введені людям або використані у ветеринарних цілях. Користувачі повинні дотримуватися всіх застосовних інструкцій і правил щодо поводження з цими клітинами та їх використання в дослідницьких цілях.
- Гарантія
У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту
Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>
- Необхідна угода про передачу матеріалів
- Так
.jpg)