Перейти до вмісту
OK
Тканина
Нирка, кора, проксимальні канальці
Синоніми
Opossum Kidney, OK-WT

Документи

OK

Cell line · Номер товару 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія OK - це постійна епітеліоподібна культура клітин, отримана з тканини нирок дорослої самки американського опосума (Didelphis virginiana). Створена in vitro, ця клітинна лінія вирізняється своїм не диплоїдним хромосомним модальним числом 23 і пристосованістю до умов культивування тканин. Спочатку отримана зі змішаних типів клітин, культура еволюціонувала в переважно епітеліальні клітини після восьми пасажів. Клітинна лінія OK була детально охарактеризована з точки зору морфології, хромосомного складу та динаміки росту, що робить її надійною моделлю для цитогенетичних досліджень та досліджень з виділення хромосом.

Однією з ключових особливостей клітинної лінії OK є її корисність у хромосомних дослідженнях, особливо для виділення Х-хромосоми ссавців. Х-хромосома опосума значно менша (приблизно на 30% менша за найменші аутосоми) і не містить великих блоків конститутивного гетерохроматину, що полегшує її відокремлення від аутосом за допомогою таких методів, як проточна мікрофлуориметрія та градієнтне центрифугування. Стабільний каріотип ОК-клітин з наявністю характерної метацентричної маркерної хромосоми розширює можливості їх застосування в геномних і хромосомних дослідженнях. Переважна інактивація батьківської Х-хромосоми у цього сумчастого є порівняльною моделлю для вивчення механізмів, що лежать в основі інактивації Х-хромосоми у ссавців.

Клітини OK також продемонстрували стійкість та адаптивність до різних умов культивування, включаючи варіації сироватки крові та різні агенти, що зупиняють мітоз, такі як Велбан (вінбластин сульфат), який є особливо ефективним для досягнення високих мітотичних індексів для виділення хромосом. Здатність клітинної лінії синхронізуватися і давати високий вихід метафазних клітин ще раз підкреслює її придатність для детального хромосомного аналізу, включаючи кількісне визначення вмісту ДНК і візуалізацію хромосомних розширень з високою роздільною здатністю.

Тканина
Нирка, кора, проксимальні канальці
Синоніми
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02Класифікація

Організм
Опосум
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні

04Ідентифікатори

Посилання
OK (код за каталогом 606465)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9267
Целозавр
CVCL_0472

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
Альфа2-адренергічні, серотонін, паратиреоїдний гормон, передсердний натрійуретичний фактор

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Дорослий