Langsung ke isi
OK
Tisu
Ginjal, korteks, tubulus proksimal
Sinonim
Opossum Kidney, OK-WT

OK

Cell line · Nomor produk 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel OK adalah kultur sel permanen mirip epitel yang berasal dari jaringan ginjal oposum Amerika betina dewasa (Didelphis virginiana). Dibuat secara in vitro, garis sel ini terkenal karena jumlah modal kromosomnya yang non-diploid, yaitu 23 dan kemampuannya beradaptasi dengan kondisi kultur jaringan. Awalnya berasal dari jenis sel campuran, kultur berevolusi menjadi sebagian besar sel epitel setelah delapan kali penempelan. Garis sel OK telah dikarakterisasi secara ekstensif dalam hal morfologi, konstitusi kromosom, dan dinamika pertumbuhan, menjadikannya model yang kuat untuk studi sitogenetik dan isolasi kromosom.

Salah satu fitur utama dari garis sel OK adalah kegunaannya dalam studi kromosom, terutama untuk mengisolasi kromosom X mamalia. Kromosom X oposum secara signifikan lebih kecil (sekitar 30% lebih kecil dari autosom terkecil) dan tidak mengandung blok besar heterokromatin konstitutif, sehingga memudahkan pemisahan dari autosom melalui teknik seperti mikrofluorometri aliran dan sentrifugasi gradien. Kariotipe yang stabil dari sel OK, dengan adanya kromosom penanda metasentris yang khas, meningkatkan aplikasinya dalam studi genom dan kromosom. Inaktivasi kromosom X paternal yang lebih disukai pada hewan berkantung ini memberikan model komparatif untuk mempelajari mekanisme yang mendasari inaktivasi kromosom X pada mamalia.

Sel-sel OK juga telah menunjukkan ketahanan dan kemampuan beradaptasi dalam berbagai kondisi kultur, termasuk variasi serum dan agen penahan mitosis yang berbeda seperti Velban (vinblastine sulfat), yang sangat efektif untuk mencapai indeks mitosis yang tinggi untuk isolasi kromosom. Kemampuan garis sel untuk menyinkronkan dan menghasilkan sel metafase dengan hasil yang tinggi semakin menggarisbawahi kesesuaiannya untuk analisis kromosom yang mendetail, termasuk kuantifikasi konten DNA dan pencitraan resolusi tinggi dari penyebaran kromosom.

Tisu
Ginjal, korteks, tubulus proksimal
Sinonim
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02Klasifikasi

Organisme
Opossum
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel

04Pengidentifikasi

Referensi
OK (Nomor katalog Cytion 606465)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9267
Cellosaurus
CVCL_0472

05Ekspresi dan kerentanan

Reseptor yang diekspresikan
Alfa2-adrenergik, serotonin, hormon paratiroid, faktor natriuretik atrium

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Dewasa