Премини към съдържанието
OK
Тъкан
Бъбрек, кора, проксимален тубул
Синоними
Opossum Kidney, OK-WT

Документи

OK

Cell line · Номер на продукта 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия OK е постоянна клетъчна култура, подобна на епител, получена от бъбречна тъкан на възрастен женски американски опосум (Didelphis virginiana). Създадена in vitro, тази клетъчна линия се отличава с недиплоидния си хромозомен модален брой от 23 и с адаптивността си към условията на тъканните култури. Първоначално получена от смесени клетъчни типове, културата еволюира до предимно епителни клетки след осем пасажа. Клетъчната линия OK е подробно характеризирана по отношение на морфологията, хромозомната структура и динамиката на растежа, което я прави надежден модел за цитогенетични изследвания и изследвания за изолиране на хромозоми.

Една от ключовите характеристики на клетъчната линия OK е нейната полезност за хромозомни изследвания, особено за изолиране на Х-хромозомата на бозайниците. Х хромозомата на опосума е значително по-малка (приблизително 30 % по-малка от най-малките автозоми) и не съдържа големи блокове от конститутивен хетерохроматин, което улеснява отделянето ѝ от автозомите чрез техники като поточна микрофлуорометрия и градиентно центрофугиране. Стабилният кариотип на OK клетките, с наличието на отличителна метацентрична маркерна хромозома, подобрява приложението им в геномни и хромозомни изследвания. Преференциалната инактивация на бащината Х-хромозома при този торбест вид осигурява сравнителен модел за изучаване на механизмите, които са в основата на инактивацията на Х-хромозомата при бозайниците.

Клетките на ОК също така демонстрират устойчивост и адаптивност при различни условия на култивиране, включително вариации на серума и различни агенти за задържане на митозата като Velban (винбластин сулфат), който е особено ефективен за постигане на високи митотични индекси за изолиране на хромозоми. Способността на клетъчната линия да се синхронизира и да произвежда високи добиви от метафазни клетки допълнително подчертава нейната пригодност за подробни хромозомни анализи, включително количествено определяне на съдържанието на ДНК и визуализиране на хромозомни разсейки с висока резолюция.

Тъкан
Бъбрек, кора, проксимален тубул
Синоними
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02Класификация

Организъм
Опосум
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
OK (каталожен номер 606465 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9267
Целозавър
CVCL_0472

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Алфа2-адренергичен, серотонин, паратироиден хормон, предсърден натриуретичен фактор

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Възрастни