Skip to content
OK
Tissue
Thận, vỏ thận, ống thận gần
Synonyms
Opossum Kidney, OK-WT

Documents

OK

Cell line · Product number 606465

The OK cell line is a permanent epithelial-like cell culture derived from kidney tissue of an adult female American opossum (Didelphis virginiana). Establ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào OK là một dòng tế bào biểu mô vĩnh viễn được phân lập từ mô thận của con chuột túi cái trưởng thành (Didelphis virginiana). Dòng tế bào này được thiết lập trong ống nghiệm và nổi bật với số lượng nhiễm sắc thể không lưỡng bội là 23, cùng khả năng thích nghi với điều kiện nuôi cấy mô. Ban đầu được phân lập từ các loại tế bào hỗn hợp, dòng tế bào này đã phát triển thành chủ yếu là tế bào biểu mô sau 8 lần truyền. Dòng tế bào OK đã được nghiên cứu kỹ lưỡng về mặt hình thái, cấu trúc nhiễm sắc thể và động học tăng trưởng, khiến nó trở thành một mô hình mạnh mẽ cho các nghiên cứu cytogenetic và tách chiết nhiễm sắc thể.

Một trong những đặc điểm chính của dòng tế bào OK là tính hữu dụng của nó trong các nghiên cứu nhiễm sắc thể, đặc biệt là trong việc tách nhiễm sắc thể X của động vật có vú. Nhiễm sắc thể X của chuột túi có kích thước nhỏ hơn đáng kể (khoảng 30% so với nhiễm sắc thể tự thể nhỏ nhất) và không chứa các khối lớn của heterochromatin cấu trúc, giúp tách biệt khỏi các nhiễm sắc thể tự thể thông qua các kỹ thuật như microfluorometry dòng chảy và ly tâm gradient. Karyotype ổn định của các tế bào OK, với sự hiện diện của một nhiễm sắc thể dấu hiệu metacentric đặc trưng, nâng cao ứng dụng của chúng trong các nghiên cứu về bộ gen và nhiễm sắc thể. Sự bất hoạt ưu tiên của nhiễm sắc thể X từ bố trong loài thú có túi này cung cấp một mô hình so sánh để nghiên cứu các cơ chế cơ bản của sự bất hoạt nhiễm sắc thể X ở động vật có vú.

Tế bào OK cũng đã chứng minh khả năng chịu đựng và thích nghi trong các điều kiện nuôi cấy khác nhau, bao gồm biến đổi huyết thanh và các tác nhân ức chế phân bào như Velban (sulfat vinblastine), đặc biệt hiệu quả trong việc đạt được chỉ số phân bào cao cho việc tách nhiễm sắc thể. Khả năng đồng bộ hóa và sản xuất lượng lớn tế bào metaphase của dòng tế bào này càng khẳng định tính phù hợp của nó cho các phân tích nhiễm sắc thể chi tiết, bao gồm định lượng nội dung DNA và hình ảnh có độ phân giải cao của các bản phết nhiễm sắc thể.

Tissue
Thận, vỏ thận, ống thận gần
Synonyms
  • Opossum Kidney
  • OK-WT

02Classification

Organism
Opossum
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô

04Identifiers

Citation
OK (Số catalog Cytion 606465)
NCBI TaxID
9267
Cellosaurus
CVCL_0472

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Alpha2-adrenergic, serotonin, hormone tuyến cận giáp, yếu tố natriuretic của tâm nhĩ

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
Người lớn