OK

La línea celular OK es un cultivo celular permanente de tipo epitelial derivado del tejido renal de una zarigüeya americana (Didelphis virginiana) hembra adulta. Establecida in vitro, esta línea celular se destaca por su número modal cromosómico no diploide de 23 y por su adaptabilidad a las condiciones del cultivo de tejidos. Aunque inicialmente se derivó de tipos celulares mixtos, el cultivo evolucionó hacia un conjunto predominantemente de células epiteliales después de ocho pases. La línea celular OK ha sido ampliamente caracterizada en términos de morfología, constitución cromosómica y dinámica de crecimiento, lo que la convierte en un modelo robusto para estudios citogenéticos y de aislamiento cromosómico.

Una de las características clave de la línea celular OK es su utilidad en estudios cromosómicos, especialmente para aislar el cromosoma X de los mamíferos. El cromosoma X de la zarigüeya es significativamente más pequeño (aproximadamente un 30 % más pequeño que los autosomas más pequeños) y no contiene grandes bloques de heterocromatina constitutiva, lo que facilita su separación de los autosomas mediante técnicas como la microfluorometría de flujo y la centrifugación en gradiente. El cariotipo estable de las células OK, con la presencia de un cromosoma marcador metacéntrico distintivo, mejora su aplicación en estudios genómicos y cromosómicos. La inactivación preferencial del cromosoma X paterno en este marsupial proporciona un modelo comparativo para estudiar los mecanismos subyacentes a la inactivación del cromosoma X en los mamíferos.

Las células OK también han demostrado resiliencia y adaptabilidad en diversas condiciones de cultivo, incluidas variaciones en el suero y diferentes agentes de detención mitótica como Velban (sulfato de vinblastina), que es particularmente eficaz para lograr altos índices mitóticos para el aislamiento cromosómico. La capacidad de la línea celular para sincronizarse y producir altos rendimientos de células en metafase subraya aún más su idoneidad para análisis cromosómicos detallados, incluyendo la cuantificación del contenido de ADN y la obtención de imágenes de alta resolución de preparaciones cromosómicas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.