Aller directement au contenu
TT
Tissu
Thyroïde, médullaire
Maladie
Carcinome médullaire héréditaire de la glande thyroïde, néoplasie endocrinienne multiple de type 2
Site métastatique
Sans objet (carcinome médullaire thyroïdien héréditaire primaire ; aucune métastase à distance documentée)
Synonymes
MTC-TT

Documents

TT

Cell line · Référence du produit 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description
Les cellules TT produisent continuellement des niveaux élevés de calcitonine et d'ACE.On a constaté que la calcitonine immunoréactive était produite dans la culture cellulaire à des niveaux de 3900 pg/million de cellules et de 7700 pg/million de cellules 24 et 72 heures respectivement, après un changement de milieu.On a constaté que l'ACE s'accumulait à plus de 27 ng/million de cellules sur une période de 72 heures.L'analyse chromosomique de la lignée cellulaire et des tumeurs induites chez les souris nude révèle un caryotype humain aneuploïde avec plusieurs chromosomes marqueurs.Les études initiales de caractérisation de la lignée cellulaire TT ont été menées en utilisant des cellules TT de premier passage cultivées dans un milieu RPMI 1640 supplémenté avec 15% de sérum bovin fœtal et 1mM de L-glutamine.On ne sait pas si les neuropeptides produits par cette lignée cellulaire lorsqu'elle est cultivée dans le milieu RPMI 1640 sont également produits par les cellules lorsqu'elles sont cultivées dans le milieu Ham's F-12K.L'analyse chromosomique de la lignée cellulaire et des tumeurs induites chez la souris nude révèle un caryotype humain aneuploïde avec plusieurs chromosomes marqueurs.
Tissu
Thyroïde, médullaire
Maladie
Carcinome médullaire héréditaire de la glande thyroïde, néoplasie endocrinienne multiple de type 2
Site métastatique
Sans objet (carcinome médullaire thyroïdien héréditaire primaire ; aucune métastase à distance documentée)
Applications
Recherche sur le carcinome médullaire de la thyroïde ; biologie des tumeurs neuroendocrines ; études sur la sécrétion de calcitonine ; biologie du syndrome MEN2 ; analyse de la voie du proto-oncogène RET ; sensibilité aux médicaments (cabozantinib, vandétanib, évérolimus) ; recherche sur les biomarqueurs neuroendocriniens ; mise au point de dosages du CEA
Synonymes
  • MTC-TT

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
Sans OGM
Informations détaillées sur le statut OGM
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Cellules neuroendocrines (cellules C / cellules parafolliculaires)
Tumorigène
Oui
Temps de doublement
environ 36 à 48 heures

04Identifiants

Référence
TT (numéro de catalogue 305027 de Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
Calcitonine, Antigène carcino-embryonnaire (ACE)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
Milieu Ham's F12K, w : 2.0 mM L-Glutamine, w : 2.0 mM Sodium pyruvate, w : 2.5 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820608a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS, 1% de NEAA et 1mM de Sodiumpyruvat
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 3
Densité de semis
1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser au moins 24 heures pour l'adhérence avant le premier changement de milieu. Remarque : la production de calcitonine peut nécessiter 24 à 72 heures après la décongélation avant d'atteindre des niveaux de sécrétion stables.
Décongélation et mise en culture

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
77 ans
Origine ethnique
Européen