- Væv
- Skjoldbruskkirtel, medulla
- Sygdom
- Arveligt medullært karcinom i skjoldbruskkirtlen, multipel endokrin neoplasi type 2
- Metastasested
- Ikke relevant (primært arveligt medullært skjoldbruskkirtelkarcinom; ingen dokumenterede fjernmetastaser)
- Synonymer
- MTC-TT
Dokumenter
TT
Cell line · Varenummer 305027
TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...
Tilpasning / Anbefalinger
- TTCell line€430.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
- TT-celler producerer kontinuerligt høje niveauer af calcitonin og CEA. immunreaktivt calcitonin viste sig at blive produceret i cellekultur på niveauer på 3900 pg/million celler og 7700 pg/million celler henholdsvis 24 og 72 timer efter et mediumskift. CEA viste sig at akkumulere til mere end 27 ng/million celler over en periode på 72 timer. kromosomanalyse af cellelinjen og tumorer induceret i nøgne mus afslører en aneuploid human karyotype med flere markørkromosomer.De første karakteriseringsstudier af TT-cellelinjen blev udført ved hjælp af TT-celler med tidlig passage dyrket i RPMI 1640-medium suppleret med 15% føtalt kvægserum og 1mM L-glutamin.Det vides ikke, om de neuropeptider, der rapporteres at blive produceret af denne cellelinje, når den blev dyrket i RPMI 1640-medium, også produceres af cellerne, når de dyrkes i Ham's F-12K-medium. Kromosomanalyse af cellelinjen og tumorer induceret i nøgenmus afslører en aneuploid human karyotype med flere markørkromosomer.
- Væv
- Skjoldbruskkirtel, medulla
- Sygdom
- Arveligt medullært karcinom i skjoldbruskkirtlen, multipel endokrin neoplasi type 2
- Metastasested
- Ikke relevant (primært arveligt medullært skjoldbruskkirtelkarcinom; ingen dokumenterede fjernmetastaser)
- Anvendelser
- Forskning i medullært skjoldbruskkirtelkarcinom; biologi ved neuroendokrine tumorer; undersøgelser af kalcitoninudskillelse; biologi ved MEN2; analyse af RET-protoonkogen-signalvejen; lægemiddelfølsomhed (cabozantinib, vandetanib, everolimus); forskning i neuroendokrine biomarkører; udvikling af CEA-analyser
- Synonymer
- MTC-TT
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-fri
- Oplysninger om GMO-status
- No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Neuroendokrine celler (C-celler / parafolikulære celler)
- Tumorfremkaldende
- Yeees
- Fordoblingstid
- ca. 36 til 48 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- TT (Cytion-katalognummer 305027)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1774
05Udtryk og modtagelighed
- Proteinekspression
- Calcitonin, carcinoembryonalt antigen (CEA)
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- Ham's F12K Medium, m: 2,0 mM L-Glutamin, m: 2,0 mM Natriumpyruvat, m: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820608a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS, 1% NEAA og 1mM Sodiumpyruvat
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Opdelingsforhold
- 1 til 3
- Såtæthed
- 1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- Efter optøning udplades cellerne med en tæthed på 5 × 10⁴ celler/cm², og der skal afventes mindst 24 timer, indtil cellerne har fæstnet sig, før det første medieskift foretages. Bemærk: Det kan tage 24–72 timer efter optøning, før produktionen af calcitonin når et stabilt sekretionsniveau.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- 77 år
- Etnisk tilhørsforhold
- Europæisk
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja