- Vev
- Skjoldbruskkjertelen, medulla
- Sykdom
- Arvelig medullært karsinom i skjoldbruskkjertelen, multippel endokrin neoplasi type 2
- Metastaseområde
- Ikke relevant (primært arvelig medullært skjoldbruskkreft; ingen dokumenterte fjernmetastaser)
- Synonymer
- MTC-TT
Dokumenter
TT
Cell line · Produktnummer 305027
TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...
Tilpasning / Anbefalinger
- TTCell line€430.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
- TT-celler produserer kontinuerlig høye nivåer av kalsitonin og CEA. immunreaktivt kalsitonin ble funnet å bli produsert i cellekultur på nivåer på 3900 pg/million celler og 7700 pg/million celler henholdsvis 24 og 72 timer etter et mediumbytte. CEA ble funnet å akkumuleres til mer enn 27 ng/million celler i løpet av en 72-timers periode. kromosomanalyse av cellelinjen og svulster indusert i nakne mus avslører en aneuploid human karyotype med flere markørkromosomer.De første karakteriseringsstudiene av TT-cellelinjen ble utført ved bruk av TT-celler fra tidlig passasje dyrket i RPMI 1640-medium supplert med 15 % føtalt bovint serum og 1 mM L-glutamin.Det er ikke kjent om nevropeptidene som er rapportert å bli produsert av denne cellelinjen når den ble dyrket i RPMI 1640-medium, også produseres av cellene når de dyrkes i Ham's F-12K-medium. Kromosomanalyse av cellelinjen og svulster indusert i nakne mus viser en aneuploid human karyotype med flere markørkromosomer.
- Vev
- Skjoldbruskkjertelen, medulla
- Sykdom
- Arvelig medullært karsinom i skjoldbruskkjertelen, multippel endokrin neoplasi type 2
- Metastaseområde
- Ikke relevant (primært arvelig medullært skjoldbruskkreft; ingen dokumenterte fjernmetastaser)
- Søknader
- Forskning på medullært skjoldbruskkreft; biologi ved nevroendokrine svulster; studier av kalsitoninsekresjon; biologi ved MEN2; analyse av RET-protoonkogen-signalveien; legemiddelfølsomhet (cabozantinib, vandetanib, everolimus); forskning på nevroendokrine biomarkører; utvikling av CEA-analyser
- Synonymer
- MTC-TT
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Kvinne
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- GMO-status
- Uten GMO
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Neuroendokrine celler (C-celler / parafollikulære celler)
- Tumorinduserende
- Ja
- Fordoblingstid
- ca. 36 til 48 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- TT (Cytion-katalognummer 305027)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1774
05Uttrykk og mottakelighet
- Proteinekspresjon
- Kalsitonin, karsinoembryonalt antigen (CEA)
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- Ham's F12K Medium, m: 2,0 mM L-Glutamin, m: 2,0 mM Natriumpyruvat, m: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820608a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS, 1 % NEAA og 1 mM Sodiumpyruvat
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Oppdelingsforhold
- 1 til 3
- Såtetthet
- 1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Gjenoppretting etter tining
- Etter opptining skal cellene sås med en tetthet på 5 × 10⁴ celler/cm², og det må gis minst 24 timer til cellene har festet seg før det første medieskiftet. Merk: Det kan ta 24–72 timer etter opptining før produksjonen av kalsitonin når stabile sekresjonsnivåer.
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Donorens alder
- 77 år
- Etnisitet
- Europeisk
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja