Μετάβαση στο περιεχόμενο
TT
Ιστός
Θυρεοειδής, μυελός
Ασθένεια
Κληρονομικό μυελώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς αδένα, Πολλαπλή ενδοκρινική νεοπλασία τύπου 2
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (πρωτοπαθές κληρονομικό μυελοειδές καρκίνωμα του θυρεοειδούς· δεν έχει καταγραφεί απομακρυσμένη μετάσταση)
Συνώνυμα
MTC-TT

Έγγραφα

TT

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Τα κύτταρα TT παράγουν συνεχώς υψηλά επίπεδα καλσιτονίνης και CEA.Η ανοσοδραστική καλσιτονίνη βρέθηκε να παράγεται σε κυτταρική καλλιέργεια σε επίπεδα 3900 pg/εκατομμύριο κύτταρα και 7700 pg/εκατομμύριο κύτταρα 24 και 72 ώρες αντίστοιχα, μετά από αλλαγή του μέσου.Το CEA βρέθηκε να συσσωρεύεται σε επίπεδα μεγαλύτερα από 27 ng/εκατομμύριο κύτταρα σε διάστημα 72 ωρών.Η χρωμοσωμική ανάλυση της κυτταρικής σειράς και των όγκων που προκλήθηκαν σε γυμνά ποντίκια αποκαλύπτει έναν ανευπλοειδή ανθρώπινο καρυότυπο με αρκετά χρωμοσώματα-δείκτες.Οι αρχικές μελέτες χαρακτηρισμού της κυτταρικής σειράς ΤΤ πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας κύτταρα ΤΤ πρώιμης διέλευσης που καλλιεργήθηκαν σε μέσο RPMI 1640 συμπληρωμένο με 15% εμβρυϊκό ορό βοοειδών και 1mM L-γλουταμίνη.Δεν είναι γνωστό εάν τα νευροπεπτίδια που αναφέρθηκε ότι παράγονται από αυτή την κυτταρική σειρά όταν καλλιεργήθηκε σε μέσο RPMI 1640 παράγονται επίσης από τα κύτταρα όταν καλλιεργούνται σε μέσο F-12K του Ham Η χρωμοσωμική ανάλυση της κυτταρικής σειράς και των όγκων που προκλήθηκαν σε γυμνά ποντίκια αποκαλύπτει έναν ανευπλοειδή ανθρώπινο καρυότυπο με αρκετά χρωμοσώματα-δείκτες.
Ιστός
Θυρεοειδής, μυελός
Ασθένεια
Κληρονομικό μυελώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς αδένα, Πολλαπλή ενδοκρινική νεοπλασία τύπου 2
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (πρωτοπαθές κληρονομικό μυελοειδές καρκίνωμα του θυρεοειδούς· δεν έχει καταγραφεί απομακρυσμένη μετάσταση)
Εφαρμογές
Έρευνα για το μυελοειδές καρκίνωμα του θυρεοειδούς· βιολογία των νευροενδοκρινικών όγκων· μελέτες έκκρισης καλσιτονίνης· βιολογία του MEN2· ανάλυση της οδού του πρωτοογκογονιδίου RET· ευαισθησία σε φάρμακα (καμποζαντινίμπη, βαντετανίμπη, εβερολίμους)· έρευνα για νευροενδοκρινικούς βιοδείκτες· ανάπτυξη μεθόδου προσδιορισμού του CEA
Συνώνυμα
  • MTC-TT

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
Χωρίς ΓΤΟ
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Τύπος κυττάρου
Νευροενδοκρινικά κύτταρα (κύτταρα C / παραθυλακικά κύτταρα)
Ογκογόνος
Ναι
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 36 έως 48 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
TT (αριθμός καταλόγου Cytion 305027)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1774

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
Καλσιτονίνη, καρκινοεμβρυϊκό αντιγόνο (CEA)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-γλουταμίνη, w: 2,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 2,5 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820608a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, 1% NEAA και 1mM Sodiumpyruvat
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 3
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 × 10⁴ κύτταρα/cm²
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, μεταφέρετε τα κύτταρα σε τρυβλία με πυκνότητα 5 × 10⁴ κύτταρα/cm² και αφήστε τα να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες πριν από την πρώτη αλλαγή του θρεπτικού μέσου. Σημείωση: Η παραγωγή καλσιτονίνης ενδέχεται να απαιτήσει 24–72 ώρες μετά την απόψυξη προτού επιτευχθούν σταθερά επίπεδα έκκρισης.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
77 χρόνια
Εθνικότητα
Ευρωπαϊκό