- Szövet
- Pajzsmirigy, medulla
- Betegség
- Örökletes pajzsmirigy medulláris karcinóma, 2-es típusú endokrin neoplázia multiplex
- Áttétes hely
- Nem alkalmazható (elsődleges örökletes medulláris pajzsmirigy-karcinóma; dokumentált távoli áttét nincs)
- Szinonimák
- MTC-TT
Dokumentumok
TT
Cell line · Termékszám 305027
TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...
Személyre szabás / Ajánlások
- TTCell line€430.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
- A TT sejtek folyamatosan nagy mennyiségű kalcitonin és CEA-t termelnek.Immunreaktív kalcitonin termelődését a sejtkultúrában 3900 pg/millió sejt és 7700 pg/millió sejt szintjén találták 24, illetve 72 órával a táptalaj cseréje után.A CEA felhalmozódását több mint 27 ng/millió sejtre találták 72 óra alatt.A sejtvonal és a meztelen egerekben indukált tumorok kromoszómaanalízise aneuploid emberi kariotípust mutat, több marker kromoszómával.A TT sejtvonal kezdeti jellemzési vizsgálatai korai passzázs TT sejtekkel történtek, amelyeket 15% magzati szarvasmarha szérummal és 1 mM L-glutaminnal kiegészített RPMI 1640 táptalajon tenyésztettek.Nem ismert, hogy a sejtvonal RPMI 1640-es tápfolyadékban történő tenyésztése során a sejtek által termelt neuropeptideket a Ham's F-12K tápfolyadékban történő tenyésztés során is termelik-e. A sejtvonal és a meztelen egerekben indukált tumorok kromoszómaanalízise aneuploid emberi kariotípust mutat, több marker kromoszómával.
- Szövet
- Pajzsmirigy, medulla
- Betegség
- Örökletes pajzsmirigy medulláris karcinóma, 2-es típusú endokrin neoplázia multiplex
- Áttétes hely
- Nem alkalmazható (elsődleges örökletes medulláris pajzsmirigy-karcinóma; dokumentált távoli áttét nincs)
- Alkalmazások
- A pajzsmirigy medulláris karcinómájának kutatása; a neuroendokrin daganatok biológiája; a kalcitonin-szekréció vizsgálata; a MEN2 biológiája; a RET protoonkogén jelátviteli útjának elemzése; gyógyszerérzékenység (cabozantinib, vandetanib, everolimus); a neuroendokrin biomarkerek kutatása; CEA-vizsgálat kidolgozása
- Szinonimák
- MTC-TT
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Nő
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-mentes
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelszerű
- Sejttípus
- Neuroendokrin sejtek (C-sejtek / parafolikuláris sejtek)
- Daganatképző
- Igen
- Kettőzési idő
- kb. 36–48 óra
04Azonosítók
- Hivatkozás
- TT (Cytion katalógusszám: 305027)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1774
05Kifejeződés és fogékonyság
- Fehérjeexpresszió
- Kalcitonin, karcinoembryonális antigén (CEA)
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- Ham's F12K médium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM nátrium-piruvát, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820608a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 1% NEAA-val és 1 mM nátrium-piruváttal
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Osztási arány
- 1–3
- Ültetési sűrűség
- 1–3 × 10⁴ sejt/cm²
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Az olvadás utáni helyreállás
- Felolvasztás után a sejteket 5 × 10⁴ sejt/cm² sűrűséggel ültessük be a tenyésztőedénybe, és az első tápközeg-csere előtt legalább 24 órát várjunk a tapadásra. Megjegyzés: A kalcitonin termelése esetében a felolvasztás után 24–72 órára lehet szükség a stabil szekréciós szint eléréséhez.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Az adományozó életkora
- 77 év
- Etnikai hovatartozás
- Európai
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen