Перейти до вмісту
TT
Тканина
Щитовидна залоза, головний мозок
Хвороба
Спадкова медулярна карцинома щитоподібної залози, Множинна ендокринна неоплазія 2 типу
Місце метастазування
Не стосується (первинна спадкова медулярна карцинома щитоподібної залози; відсутність задокументованих віддалених метастазів)
Синоніми
MTC-TT

Документи

TT

Cell line · Номер товару 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис
Імунореактивний кальцитонін виробляється в культурі клітин на рівні 3900 пг/млн. клітин і 7700 пг/млн. клітин через 24 і 72 години після зміни середовища, відповідно. Імунореактивний кальцитонін накопичується до 27 нг/млн. клітин протягом 72 годин. Хромосомний аналіз клітинної лінії і пухлин, індукованих у голих мишей, виявив анеуплоїдний каріотип людини з декількома маркерними хромосомами.Початкові дослідження клітинної лінії ТТ були проведені з використанням клітин ТТ раннього пасажу, культивованих у середовищі RPMI 1640 з додаванням 15% фетальної сироватки великої рогатої худоби та 1 мМ L-глутаміну.Невідомо, чи нейропептиди, які, як повідомлялося, продукуються цією клітинною лінією при вирощуванні в середовищі RPMI 1640, також продукуються клітинами при культивуванні в середовищі Ham's F-12K. Хромосомний аналіз клітинної лінії та пухлин, індукованих у голих мишей, виявив анеуплоїдний каріотип людини з кількома маркерними хромосомами.
Тканина
Щитовидна залоза, головний мозок
Хвороба
Спадкова медулярна карцинома щитоподібної залози, Множинна ендокринна неоплазія 2 типу
Місце метастазування
Не стосується (первинна спадкова медулярна карцинома щитоподібної залози; відсутність задокументованих віддалених метастазів)
Застосування
Дослідження медулярної карциноми щитоподібної залози; біологія нейроендокринних пухлин; дослідження секреції кальцитоніну; біологія синдрому MEN2; аналіз шляху дії протоонкогену RET; чутливість до лікарських препаратів (кабозантиніб, вандетаніб, еверолімус); дослідження нейроендокринних біомаркерів; розробка методів визначення CEA
Синоніми
  • MTC-TT

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
Без ГМО
Детальна інформація щодо статусу ГМО
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Нейроендокринні клітини (С-клітини / парафолікулярні клітини)
Пухлиноутворювальний
Так
Час подвоєння
приблизно від 36 до 48 годин

04Ідентифікатори

Посилання
TT (номер у каталозі Cytion 305027)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1774

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
Кальцитонін, карциноембріональний антиген (СЕА)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
Середовище Ham's F12K, w: 2,0 мМ L-глутамін, w: 2,0 мМ піруват натрію, w: 2,5 г/л NaHCO3 (цит. номер 820608a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS, 1% NEAA та 1 мМ натрійпірувату
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 3
Щільність висіву
від 1 до 3 × 10⁴ клітин/см²
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 × 10⁴ клітин/см² і дайте їм прикріпитися протягом щонайменше 24 годин перед першою заміною середовища. Примітка: для досягнення стабільного рівня секреції кальцитоніну може знадобитися 24–72 години після розморожування.
Розморожування та культивування

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
77 років
Етнічна приналежність
Європейський