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TT
Tissue
Tireóide, medula
Disease
Carcinoma medular hereditário da glândula tireoide, Neoplasia endócrina múltipla tipo 2
Metastatic site
Não aplicável (carcinoma medular da tireoide hereditário primário; sem metástase à distância documentada)
Synonyms
MTC-TT

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TT

Cell line · Product number 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description
As células TT produzem continuamente altos níveis de calcitonina e CEA. Verificou-se que a calcitonina imunorreativa era produzida em cultura celular em níveis de 3.900 pg/milhão de células e 7.700 pg/milhão de células 24 e 72 horas, respectivamente, após a troca do meio.Verificou-se que o CEA se acumulava a níveis superiores a 27 ng/milhão de células ao longo de um período de 72 horas. A análise cromossômica da linhagem celular e dos tumores induzidos em camundongos nude revela um cariótipo humano aneuploide com vários cromossomos marcadores.Os estudos iniciais de caracterização da linhagem celular TT foram realizados utilizando células TT de passagem inicial cultivadas no meio RPMI 1640 suplementado com 15% de soro fetal bovino e 1 mM de L-glutamina.Não se sabe se os neuropeptídeos que, segundo relatos, são produzidos por essa linhagem celular quando cultivada no meio RPMI 1640 também são produzidos pelas células quando cultivadas no meio Ham’s F-12K.A análise cromossômica da linhagem celular e dos tumores induzidos em camundongos nude revela um cariótipo humano aneuploide com vários cromossomos marcadores.
Tissue
Tireóide, medula
Disease
Carcinoma medular hereditário da glândula tireoide, Neoplasia endócrina múltipla tipo 2
Metastatic site
Não aplicável (carcinoma medular da tireoide hereditário primário; sem metástase à distância documentada)
Applications
Pesquisa sobre o carcinoma medular da tireoide; biologia dos tumores neuroendócrinos; estudos sobre a secreção de calcitonina; biologia da MEN2; análise da via do proto-oncogene RET; sensibilidade a medicamentos (cabozantinibe, vandetanibe, everolimus); pesquisa sobre biomarcadores neuroendócrinos; desenvolvimento de ensaios de CEA
Synonyms
  • MTC-TT

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Células neuroendócrinas (células C / células parafoliculares)
Tumourigenic
Sim
Doubling time
aproximadamente 36 a 48 horas

04Identifiers

Citation
TT (número de catálogo da Cytion 305027)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Expression and susceptibility

Protein expression
Calcitonina, Antígeno Carcinoembrionário (CEA)

06Handling and culture

Culture medium
Médio F12K de Ham, contendo: 2,0 mM de L-glutamina, 2,0 mM de piruvato de sódio e 2,5 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820608a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione ao meio 10% de FBS, 1% de NEAA e 1 mM de piruvato de sódio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Split ratio
1 a 3
Seeding density
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 × 10⁴ células/cm² e aguarde pelo menos 24 horas para que se fixem antes da primeira troca de meio. Observação: a produção de calcitonina pode levar de 24 a 72 horas após o descongelamento para atingir níveis estáveis de secreção.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
77 anos
Ethnicity
Europeu