- Vävnad
- Sköldkörtel, märg
- Sjukdom
- Ärftlig medullär karcinom i sköldkörteln, multipel endokrin neoplasi typ 2
- Metastaseringsställe
- Ej tillämpligt (primärt ärftligt medullärt sköldkörtelkarcinom; inga dokumenterade fjärrmetastaser)
- Synonymer
- MTC-TT
Dokument
TT
Cell line · Produktnummer 305027
TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...
Anpassning / Rekommendationer
- TTCell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
- TT-celler producerar kontinuerligt höga nivåer av kalcitonin och CEA.immunoreaktivt kalcitonin producerades i cellkultur i nivåer på 3900 pg/miljoner celler och 7700 pg/miljoner celler 24 respektive 72 timmar efter ett mediumbyte.CEA ackumulerades till mer än 27 ng/miljoner celler under en 72-timmarsperiod.kromosomanalys av cellinjen och tumörer inducerade i nakna möss visar en aneuploid human karyotyp med flera markörkromosomer.De första karaktäriseringsstudierna av TT-cellinjen genomfördes med TT-celler från tidig passage som odlades i RPMI 1640-medium kompletterat med 15% fetalt bovint serum och 1mM L-glutamin.Det är inte känt om de neuropeptider som rapporterats produceras av denna cellinje när den odlades i RPMI 1640-medium också produceras av cellerna när de odlas i Ham's F-12K-medium.kromosomanalys av cellinjen och tumörer inducerade i nakna möss visar en aneuploid human karyotyp med flera markörkromosomer.
- Vävnad
- Sköldkörtel, märg
- Sjukdom
- Ärftlig medullär karcinom i sköldkörteln, multipel endokrin neoplasi typ 2
- Metastaseringsställe
- Ej tillämpligt (primärt ärftligt medullärt sköldkörtelkarcinom; inga dokumenterade fjärrmetastaser)
- Ansökningar
- Forskning om medullärt sköldkörtelkarcinom; biologi hos neuroendokrina tumörer; studier av kalcitonins utsöndring; biologi hos MEN2; analys av RET-protoonkogenets signalväg; läkemedelskänslighet (cabozantinib, vandetanib, everolimus); forskning om neuroendokrina biomarkörer; utveckling av CEA-analysmetoder
- Synonymer
- MTC-TT
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- GMO-status
- Utan genetiskt modifierade organismer
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Celltyp
- Neuroendokrina celler (C-celler / parafollikulära celler)
- Tumörframkallande
- Ja
- Fördubblingstid
- ca 36 till 48 timmar
04Identifierare
- Källa
- TT (Cytion katalognummer 305027)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1774
05Uttryck och mottaglighet
- Proteinexpression
- Kalcitonin, Carcinoembryonalt antigen (CEA)
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820608a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS, 1% NEAA och 1mM Sodiumpyruvat
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Uppdelningsförhållande
- 1 till 3
- Såtäthet
- 1 till 3 × 10⁴ celler/cm²
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Efter upptining ska cellerna odlas med en täthet på 5 × 10⁴ celler/cm² och få fästa i minst 24 timmar innan det första medielbytet. Obs! Det kan ta 24–72 timmar efter upptining innan kalcitoninproduktionen når stabila utsöndringsnivåer.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- 77 år
- Etnicitet
- Europeiska
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja