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TT
Tecido
Tiroide, medula
Doença
Carcinoma medular hereditário da glândula tiroide, Neoplasia endócrina múltipla tipo 2
Local da metástase
Não aplicável (carcinoma medular da tiróide hereditário primário; sem metástases à distância documentadas)
Sinónimos
MTC-TT

Documentos

TT

Cell line · Número do produto 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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Recomendado (lote mais recente)
1

01Informações gerais

Descrição
As células TT produzem continuamente níveis elevados de calcitonina e de CEA. Verificou-se que a calcitonina imunorreactiva é produzida em cultura celular a níveis de 3900 pg/milhão de células e de 7700 pg/milhão de células, 24 e 72 horas respetivamente, após uma mudança de meio. Verificou-se que a CEA se acumula a mais de 27 ng/milhão de células durante um período de 72 horas.Os estudos de caraterização inicial da linha celular TT foram efectuados utilizando células TT de passagem inicial cultivadas em meio RPMI 1640 suplementado com 15% de soro fetal bovino e 1mM L-glutamina.Não se sabe se os neuropeptídeos produzidos por esta linha celular quando cultivada em meio RPMI 1640 também são produzidos pelas células quando cultivadas em meio Ham's F-12K. A análise cromossómica da linha celular e dos tumores induzidos em ratinhos nus revela um cariótipo humano aneuploide com vários cromossomas marcadores.
Tecido
Tiroide, medula
Doença
Carcinoma medular hereditário da glândula tiroide, Neoplasia endócrina múltipla tipo 2
Local da metástase
Não aplicável (carcinoma medular da tiróide hereditário primário; sem metástases à distância documentadas)
Aplicações
Investigação sobre o carcinoma medular da tiróide; biologia dos tumores neuroendócrinos; estudos sobre a secreção de calcitonina; biologia da MEN2; análise da via do proto-oncogene RET; sensibilidade aos fármacos (cabozantinib, vandetanib, everolimus); investigação sobre biomarcadores neuroendócrinos; desenvolvimento de ensaios de CEA
Sinónimos
  • MTC-TT

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
Sem OGM
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células neuroendócrinas (células C / células parafoliculares)
Tumorigénico
Sim
Tempo de duplicação
aprox. 36 a 48 horas

04Identificadores

Referência
TT (número de catálogo da Cytion 305027)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Calcitonina, Antigénio Carcinoembrionário (CEA)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Ham's F12K Medium, com: 2,0 mM L-Glutamina, com: 2,0 mM Piruvato de sódio, com: 2,5 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820608a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 1% de NEAA e 1mM de piruvato de sódio
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após a descongelação, semeie as células a uma densidade de 5 × 10⁴ células/cm² e aguarde pelo menos 24 horas para que adiram antes da primeira troca de meio. Nota: A produção de calcitonina pode demorar entre 24 e 72 horas após a descongelação até atingir níveis estáveis de secreção.
Descongelamento e cultura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
77 anos
Etnia
Europeu