Mine otse sisu juurde
TT
Kude
Kilpnääre, keskosa
Haigus
Pärilik kilpnäärme medullaarne kartsinoom, 2. tüüpi hulgiline endokriinsete neoplaasia
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (primaarne pärilik medullaarne kilpnäärmekartsinoom; dokumenteeritud kaugmetastaase puuduvad)
Sünonüümid
MTC-TT

Dokumendid

TT

Cell line · Toote number 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus
TT rakud toodavad pidevalt kõrget kaltsitoniini ja CEA taset.Immunoreaktiivset kaltsitoniini leiti rakukultuuris toodetavat vastavalt 3900 pg/miljon rakku ja 7700 pg/miljon rakku 24 ja 72 tundi pärast söötme vahetamist.CEA akumuleerub 72 tunni jooksul rohkem kui 27 ng/miljon rakku.Rakuliini ja alasti hiirtel indutseeritud kasvajate kromosoomianalüüs näitab aneuploidset inimkaryotüüpi mitme marker-kromosoomiga.TT rakuliini esialgsed iseloomustusuuringud viidi läbi, kasutades TT rakke, mida kasvatati RPMI 1640 keskkonnas, millele lisati 15% veise loote seerumit ja 1mM L-glutamiini.Ei ole teada, kas neuropeptiide, mida see rakuliin toodab RPMI 1640 keskkonnas kasvatamisel, toodavad rakud ka siis, kui neid kasvatatakse Ham's F-12K keskkonnas.Rakuliini ja alasti hiirtel indutseeritud kasvajate kromosoomianalüüs näitab inimese aneuploidset karyotüüpi mitme markerkromosoomiga.
Kude
Kilpnääre, keskosa
Haigus
Pärilik kilpnäärme medullaarne kartsinoom, 2. tüüpi hulgiline endokriinsete neoplaasia
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (primaarne pärilik medullaarne kilpnäärmekartsinoom; dokumenteeritud kaugmetastaase puuduvad)
Rakendused
Kilpnäärme medullaarkartsinoomi uurimine; neuroendokriinsete kasvajate bioloogia; kaltsitoniini sekretsiooni uuringud; MEN2 bioloogia; RET-protoonkogeeni signaalitee analüüs; ravimite suhtes tundlikkus (kabozantinib, vandetanib, everoliimus); neuroendokriinsete biomarkerite uurimine; CEA-analüüsi väljatöötamine
Sünonüümid
  • MTC-TT

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Neuroendokriinsed rakud (C-rakud / parafollikulaarsed rakud)
Tuumorigeenne
Jah
Kahekordistumisaeg
umbes 36–48 tundi

04Tunnused

Viide
TT (Cytioni katalooginumber 305027)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Kaltsitoniin, kartsinoembrüonaalne antigeen (CEA)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820608a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 1% NEAA ja 1mM naatriumpüruvaadiga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist külvake rakud tihedusega 5 × 10⁴ rakku/cm² ja laske neil enne esimest kasvukeskkonna vahetust vähemalt 24 tundi kinnituda. Märkus: Kaltsitoniini tootmine võib pärast sulatamist võtta aega 24–72 tundi, enne kui saavutatakse stabiilne sekretsioonitase.
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
77 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa