Skip to content
TT
Tissue
ต่อมไทรอยด์, ส่วนเมดัลลา
Disease
มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดเมดุลลารีที่ถ่ายทอดทางพันธุกรรม, เนื้องอกต่อมไร้ท่อหลายชนิดชนิดที่ 2
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดเมดูลลารีที่ถ่ายทอดทางพันธุกรรมชนิดปฐมภูมิ; ไม่มีหลักฐานการแพร่กระจายไปยังอวัยวะอื่น)
Synonyms
MTC-TT

Documents

TT

Cell line · Product number 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description
เซลล์ TT ผลิตแคลซิโทนินและ CEA ในระดับสูงอย่างต่อเนื่อง พบว่าแคลซิโทนินที่ตอบสนองต่อภูมิคุ้มกันถูกผลิตในวัฒนธรรมเซลล์ที่ระดับ 3,900 พิโคกรัม/ล้านเซลล์ และ 7,700 พิโคกรัม/ล้านเซลล์ ในเวลา 24 และ 72 ชั่วโมงตามลำดับ หลังจากการเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ พบว่า CEA สะสมมากกว่า 27 นาโนกรัม/ล้านเซลล์ในช่วงเวลา 72 ชั่วโมงการวิเคราะห์โครโมโซมของเซลล์ไลน์และเนื้องอกที่เหนี่ยวนำในหนูเมาส์นู้ดเผยให้เห็นโครโมโซมของมนุษย์ที่มีความผิดปกติของจำนวนโครโมโซม (aneuploidy) พร้อมด้วยโครโมโซมเครื่องหมายหลายตัว การศึกษาลักษณะเบื้องต้นของเซลล์ไลน์ TT ดำเนินการโดยใช้เซลล์ TT ที่เพาะเลี้ยงในระยะเริ่มต้นในอาหารเลี้ยงเซลล์ RPMI 1640 ที่เสริมด้วยเซรั่มจากเลือดวัวตัวอ่อน 15% และ L-glutamine 1 มิลลิโมลาร์ยังไม่ทราบว่านิวโรเปปไทด์ที่รายงานว่าถูกผลิตโดยเซลล์ไลน์นี้เมื่อเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเซลล์ RPMI 1640 จะถูกผลิตโดยเซลล์เมื่อเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเซลล์ Ham's F-12K ด้วยหรือไม่ การวิเคราะห์โครโมโซมของเซลล์ไลน์และเนื้องอกที่เหนี่ยวนำในหนูเมาส์ที่ไม่มีระบบภูมิคุ้มกัน (nude mice) พบว่ามีโครโมโซมผิดปกติแบบไม่สมดุล (aneuploidy) และมีโครโมโซมเครื่องหมายหลายตัว
Tissue
ต่อมไทรอยด์, ส่วนเมดัลลา
Disease
มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดเมดุลลารีที่ถ่ายทอดทางพันธุกรรม, เนื้องอกต่อมไร้ท่อหลายชนิดชนิดที่ 2
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดเมดูลลารีที่ถ่ายทอดทางพันธุกรรมชนิดปฐมภูมิ; ไม่มีหลักฐานการแพร่กระจายไปยังอวัยวะอื่น)
Applications
การวิจัยมะเร็งไทรอยด์ชนิดเมดูลลารี; ชีววิทยาของเนื้องอกระบบประสาทต่อมไร้ท่อ; การศึกษาการหลั่งแคลซิโทนิน; ชีววิทยาของกลุ่มอาการ MEN2; การวิเคราะห์เส้นทางโปรโตออนโคจีน RET; ความไวต่อยา (คาโบซันทินิบ, แวนเดทานิบ, เอเวอโรลิมัส); การวิจัยตัวบ่งชี้ทางชีวภาพของเนื้องอกระบบประสาทต่อมไร้ท่อ; การพัฒนาการทดสอบ CEA
Synonyms
  • MTC-TT

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์ประสาทต่อมไร้ท่อ (เซลล์ C / เซลล์พาโรโฟลิกคูลาร์)
Tumourigenic
ใช่
Doubling time
ประมาณ 36 ถึง 48 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
TT (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305027)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Expression and susceptibility

Protein expression
แคลซิโทนิน, แอนติเจนคาร์ซินโนเอ็มบริโอนิก (CEA)

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820608a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, NEAA 1% และโซเดียมไพรูแวต 1mM
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 3
Seeding density
1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์บนจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 × 10⁴ เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ยึดเกาะอย่างน้อย 24 ชั่วโมงก่อนเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเชื้อครั้งแรก หมายเหตุ: การผลิตแคลซิโทนินอาจต้องใช้เวลา 24–72 ชั่วโมงหลังการละลายน้ำแข็งก่อนที่ระดับการหลั่งจะคงที่
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
77 ปี
Ethnicity
ยุโรป