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TT
ティッシュ
甲状腺、髄質
病気
遺伝性甲状腺髄様癌、多発性内分泌腫瘍2型
転移部位
該当なし(原発性遺伝性甲状腺髄様癌;遠隔転移の記録なし)
同義語
MTC-TT

TT

Cell line · 製品番号 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

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01概要

説明
TT細胞は、高レベルのカルシトニンとCEAを継続的に産生する。免疫反応性カルシトニンは、培地交換後24時間と72時間で、それぞれ3900 pg/百万細胞と7700 pg/百万細胞のレベルで細胞培養中に産生されることが判明した。TT細胞株の初期特性研究は、15%ウシ胎児血清と1mM L-グルタミンを添加したRPMI1640培地で培養した初期継代TT細胞を用いて行われた。この細胞株がRPMI1640培地で培養されたときに産生されたと報告された神経ペプチドが、Ham's F-12K培地で培養されたときにも産生されるかどうかは不明である。この細胞株とヌードマウスで誘発された腫瘍の染色体分析から、いくつかのマーカー染色体を持つ異数体ヒト核型が明らかになった。
ティッシュ
甲状腺、髄質
病気
遺伝性甲状腺髄様癌、多発性内分泌腫瘍2型
転移部位
該当なし(原発性遺伝性甲状腺髄様癌;遠隔転移の記録なし)
用途
甲状腺髄様癌の研究;神経内分泌腫瘍の生物学;カルシトニン分泌に関する研究;MEN2の生物学;RET発癌遺伝子経路の解析;薬剤感受性(カボザンチニブ、バンデタニブ、エベロリムス);神経内分泌バイオマーカーの研究;CEA測定法の開発
同義語
  • MTC-TT

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
非遺伝子組み換え
GMOのステータスに関する詳細
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
神経内分泌細胞(C細胞/傍濾胞細胞)
腫瘍形成性
はい
倍増時間
約36~48時間

04識別子

引用
TT(Cytion カタログ番号 305027)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1774

05発現と感受性

タンパク質の発現
カルシトニン、カルサイノエンブリオニック抗原(CEA)

06取り扱いと飼育

培地
ハムF12K培地、w:2.0 mM L-グルタミン、w:2.0 mM ピルビン酸ナトリウム、w:2.5 g/L NaHCO3(Cytion article number 820608a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、1% NEAA、1mM Sodiumpyruvatを加える。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
分割比率
1~3
播種密度
1~3 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5 × 10⁴ 細胞/cm²の密度で播種し、最初の培地交換を行う前に、少なくとも24時間かけて細胞の付着を待ちます。注:カルシトニンの産生が安定した分泌レベルに達するまでには、解凍後24~72時間かかる場合があります。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
77年
民族
ヨーロピアン