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TT
Pañuelo de papel
Tiroides, médula
Enfermedad
Carcinoma medular hereditario de la glándula tiroides, Neoplasia endocrina múltiple tipo 2
Lugar de metástasis
No aplicable (carcinoma medular de tiroides hereditario primario; sin metástasis a distancia documentadas)
Sinónimos
MTC-TT

Documentos

TT

Cell line · Número de producto 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

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01Información general

Descripción
Las células TT producen continuamente altos niveles de calcitonina y CEA. Se observó que la calcitonina inmunorreactiva se producía en el cultivo celular a niveles de 3900 pg/millón de células y 7700 pg/millón de células 24 y 72 horas, respectivamente, después de un cambio de medio.Se observó que el CEA se acumulaba a más de 27 ng/millón de células durante un período de 72 horas.El análisis cromosómico de la línea celular y de los tumores inducidos en ratones desnudos revela un cariotipo humano aneuploide con varios cromosomas marcadores.Los estudios iniciales de caracterización de la línea celular TT se realizaron utilizando células TT de pasaje temprano cultivadas en medio RPMI 1640 suplementado con 15% de suero bovino fetal y 1mM de L-glutamina.Se desconoce si los neuropéptidos producidos por esta línea celular cuando se cultivó en medio RPMI 1640 también son producidos por las células cuando se cultivan en medio F-12K de Ham. El análisis cromosómico de la línea celular y de los tumores inducidos en ratones desnudos revela un cariotipo humano aneuploide con varios cromosomas marcadores.
Pañuelo de papel
Tiroides, médula
Enfermedad
Carcinoma medular hereditario de la glándula tiroides, Neoplasia endocrina múltiple tipo 2
Lugar de metástasis
No aplicable (carcinoma medular de tiroides hereditario primario; sin metástasis a distancia documentadas)
Aplicaciones
Investigación sobre el carcinoma medular de tiroides; biología de los tumores neuroendocrinos; estudios sobre la secreción de calcitonina; biología del síndrome MEN2; análisis de la vía del protooncogén RET; sensibilidad a los fármacos (cabozantinib, vandetanib, everolimus); investigación sobre biomarcadores neuroendocrinos; desarrollo de ensayos de CEA
Sinónimos
  • MTC-TT

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
Sin OGM
Detalles sobre la presencia de OMG
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células neuroendocrinas (células C / células parafoliculares)
Tumorigénico
Sí
Tiempo de duplicación
entre 36 y 48 horas, aproximadamente

04Identificadores

Referencia
TT (número de catálogo de Cytion 305027)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Calcitonina, antígeno carcinoembrionario (CEA)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
Medio Ham's F12K, w: 2,0 mM L-Glutamina, w: 2,0 mM Piruvato sódico, w: 2,5 g/L NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820608a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, 1% NEAA y 1mM Sodiumpyruvat
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Relación de división
Del 1 al 3
Densidad de siembra
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Tras la descongelación, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se adhieran durante al menos 24 horas antes del primer cambio de medio. Nota: La producción de calcitonina puede tardar entre 24 y 72 horas tras la descongelación en alcanzar niveles de secreción estables.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
77 años
Origen étnico
Europea