- Audinys
- Skydliaukė, medula
- Liga
- Paveldima skydliaukės medulinė karcinoma, 2 tipo daugybinė endokrininė neoplazija
- Metastazių vieta
- Netaikoma (pirminė paveldima skydliaukės medulinė karcinoma; nėra užfiksuotų tolimųjų metastazių)
- Sinonimai
- MTC-TT
Dokumentai
TT
Cell line · Prekės numeris 305027
TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- TTCell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
- TT ląstelės nuolat gamina didelį kalcitonino ir CEA kiekį.Nustatyta, kad ląstelių kultūroje imunoreaktyvus kalcitoninas gaminamas 3900 pg/mln. ląstelių ir 7700 pg/mln. ląstelių praėjus atitinkamai 24 ir 72 valandoms po terpės pakeitimo.Nustatyta, kad CEA per 72 valandas susikaupia iki daugiau kaip 27 ng/mln. ląstelių.Atlikus ląstelių linijos ir navikų, sukeltų nuogoms pelėms, chromosominę analizę, nustatytas aneuploidinis žmogaus kariotipas su keliomis žyminėmis chromosomomis.Pradiniai TT ląstelių linijos apibūdinimo tyrimai atlikti naudojant ankstyvosios stadijos TT ląsteles, augintas RPMI 1640 terpėje, papildytoje 15 % embrioninio galvijų serumo ir 1 mM L-glutamino.Nežinoma, ar neuropeptidus, apie kuriuos pranešta, kad ši ląstelių linija gamina, kai ji buvo auginama RPMI 1640 terpėje, ląstelės gamina ir tada, kai jos kultivuojamos Hamo F-12K terpėje.Atlikus ląstelių linijos ir navikų, sukeltų nuogoms pelėms, chromosominę analizę, nustatytas aneuploidinis žmogaus kariotipas su keliomis žyminčiomis chromosomomis.
- Audinys
- Skydliaukė, medula
- Liga
- Paveldima skydliaukės medulinė karcinoma, 2 tipo daugybinė endokrininė neoplazija
- Metastazių vieta
- Netaikoma (pirminė paveldima skydliaukės medulinė karcinoma; nėra užfiksuotų tolimųjų metastazių)
- Paraiškos
- Skydliaukės medulinės karcinomos tyrimai; neuroendokrininių navikų biologija; kalcitonino sekrecijos tyrimai; MEN2 biologija; RET protoonkogeno signalo kelio analizė; jautrumas vaistams (kabozantinibas, vandetanibas, everolimusas); neuroendokrininių biomarkerių tyrimai; CEA tyrimo metodo kūrimas
- Sinonimai
- MTC-TT
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- GMO statusas
- Be GMO
- Išsami informacija apie GMO statusą
- No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Ląstelių tipas
- Neuroendokrininės ląstelės (C ląstelės / parafolikulinės ląstelės)
- Tumorogeninis
- Taip
- Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
- maždaug nuo 36 iki 48 valandų
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- TT (Cytion katalogo numeris 305027)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1774
05Išraiška ir jautrumas
- Baltojų baltymų ekspresija
- Kalcitoninas, karcinoembrioninis antigenas(CEA)
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- Ham's F12K terpė, w: 2,0 mM L-Glutaminas, w: 2,0 mM natrio piruvatas, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820608a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS, 1 % NEAA ir 1 mM natrio piruvato
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Skaidymo santykis
- 1–3
- Sėjos tankis
- nuo 1 iki 3 × 10⁴ ląstelių/cm²
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius, ląsteles pasėkite 5 × 10⁴ ląstelių/cm² tankumu ir prieš pirmąjį terpės keitimą palaukite mažiausiai 24 valandas, kol ląstelės prisitvirtins. Pastaba: kad kalcitonino sekrecijos lygis pasiektų stabilų lygį, po atšildymo gali prireikti 24–72 valandų.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 77 metai
- Etninė priklausomybė
- Europos
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip