- Kudos
- Kilpirauhanen, ydin
- Sairaus
- Perinnöllinen kilpirauhasen medullaarinen karsinooma, Multippeli endokriininen neoplasia tyyppi 2
- Metastaasikohde
- Ei sovelleta (primaarinen perinnöllinen medullaarinen kilpirauhassyöpä; etämetastaaseja ei ole dokumentoitu)
- Synonyymit
- MTC-TT
Asiakirjat
TT
Cell line · Tuotenumero 305027
TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...
Räätälöinti / Suositukset
- TTCell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
- TT-solut tuottavat jatkuvasti suuria määriä kalsitoniinia ja CEA:ta.Immunoreaktiivista kalsitoniinia havaittiin tuotettavan soluviljelmässä 3900 pg/miljoonaa solua ja 7700 pg/miljoonaa solua 24 ja 72 tuntia väliaineen vaihdon jälkeen.CEA:n havaittiin kertyvän yli 27 ng/miljoonaan soluun 72 tunnin aikana.Solulinjan ja alastomilla hiirillä indusoitujen kasvainten kromosomianalyysi paljastaa aneuploidisen ihmiskaryotyypin, jossa on useita merkkikromosomeja.TT-solulinjan ensimmäiset karakterisointitutkimukset tehtiin käyttäen TT-soluja, joita kasvatettiin RPMI 1640 -mediassa, jota täydennettiin 15 %:lla naudan sikiöseerumilla ja 1 mM L-glutamiinilla.Ei tiedetä, tuottavatko solut niitä neuropeptidejä, joita tämän solulinjan raportoitiin tuottavan, kun sitä kasvatettiin RPMI 1640 -alustassa, myös silloin, kun niitä kasvatetaan Ham's F-12K -alustassa. solulinjan ja alastomilla hiirillä indusoitujen kasvainten kromosomianalyysi paljastaa aneuploidisen ihmisen karyotyypin, jossa on useita merkkikromosomeja.
- Kudos
- Kilpirauhanen, ydin
- Sairaus
- Perinnöllinen kilpirauhasen medullaarinen karsinooma, Multippeli endokriininen neoplasia tyyppi 2
- Metastaasikohde
- Ei sovelleta (primaarinen perinnöllinen medullaarinen kilpirauhassyöpä; etämetastaaseja ei ole dokumentoitu)
- Sovellukset
- Kilpirauhasen medullaarisen karsinooman tutkimus; neuroendokriinisten kasvainten biologia; kalsitoniinin eritystä koskevat tutkimukset; MEN2-oireyhtymän biologia; RET-protoonkogeenin signalointireitin analyysi; lääkeherkkyys (kabozantiniibi, vandetanibi, everolimuusi); neuroendokriinisten biomarkkerien tutkimus; CEA-määrityksen kehittäminen
- Synonyymit
- MTC-TT
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- GMO-status
- GMO-vapaa
- GMO-statuksen tiedot
- No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Solutyyppi
- Neuroendokriiniset solut (C-solut / parafollikulaariset solut)
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä
- Kaksinkertaistumisaika
- noin 36–48 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- TT (Cytion-tuotenumero 305027)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1774
05Ilmentyminen ja alttius
- Proteiinin ilmentyminen
- Kalsitoniini, karsinoembryoninen antigeeni (CEA)
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiinia, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820608a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, 1 % NEAA:lla ja 1 mM natriumpyruvatilla
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Jakosuhde
- 1–3
- Kylvötiheys
- 1–3 × 10⁴ solua/cm²
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulatuksen jälkeen solut siirretään viljelyastioihin tiheydellä 5 × 10⁴ solua/cm² ja annetaan niiden kiinnittyä vähintään 24 tuntia ennen ensimmäistä elatusaineen vaihtoa. Huomautus: Kalsitoniinin tuotanto saattaa vaatia 24–72 tuntia sulatuksen jälkeen, ennen kuin erittymistasot vakiintuvat.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 77 vuotta
- Etnisyys
- Eurooppalainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä