
- Chusteczka
- Tarczyca, rdzeń
- Choroba
- Dziedziczny rak rdzeniasty tarczycy, mnoga gruczolakowatość wewnątrzwydzielnicza typu 2
- Miejsce przerzutów
- Nie dotyczy (pierwotny dziedziczny rak rdzeniasty tarczycy; brak udokumentowanych przerzutów odległych)
- Synonimy
- MTC-TT
Dokumenty
TT
Cell line · Numer produktu 305027
TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...
Dostosowanie / Zalecenia
- TTCell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
- Komórki TT stale wytwarzają wysoki poziom kalcytoniny i CEA. Stwierdzono, że immunoreaktywna kalcytonina jest wytwarzana w hodowli komórkowej na poziomie 3900 pg/milion komórek i 7700 pg/milion komórek odpowiednio 24 i 72 godziny po zmianie pożywki. Stwierdzono, że CEA gromadzi się do ponad 27 ng/milion komórek w ciągu 72 godzin. Analiza chromosomalna linii komórkowej i guzów indukowanych u nagich myszy ujawnia aneuploidalny ludzki kariotyp z kilkoma chromosomami markerowymi.Wstępne badania charakterystyki linii komórkowej TT przeprowadzono przy użyciu komórek TT wczesnego pasażowania hodowanych w pożywce RPMI 1640 uzupełnionej 15% płodową surowicą bydlęcą i 1mM L-glutaminą.Nie wiadomo, czy neuropeptydy wytwarzane przez tę linię komórkową, gdy była hodowana w pożywce RPMI 1640, są również wytwarzane przez komórki, gdy są hodowane w pożywce Ham's F-12K. Analiza chromosomalna linii komórkowej i guzów indukowanych u nagich myszy ujawnia aneuploidalny ludzki kariotyp z kilkoma chromosomami markerowymi.
- Chusteczka
- Tarczyca, rdzeń
- Choroba
- Dziedziczny rak rdzeniasty tarczycy, mnoga gruczolakowatość wewnątrzwydzielnicza typu 2
- Miejsce przerzutów
- Nie dotyczy (pierwotny dziedziczny rak rdzeniasty tarczycy; brak udokumentowanych przerzutów odległych)
- Zastosowania
- Badania nad rakiem rdzeniastym tarczycy; biologia nowotworów neuroendokrynnych; badania nad wydzielaniem kalcytoniny; biologia zespołu MEN2; analiza szlaku protoonkogenu RET; wrażliwość na leki (kabozantynib, wandetanib, ewerolimus); badania nad biomarkerami neuroendokrynnymi; opracowywanie testów na poziom CEA
- Synonimy
- MTC-TT
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- Bez GMO
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Typ komórki
- Komórki neuroendokrynne (komórki typu C / komórki parafolikularne)
- Nowotworotwórczy
- Tak
- Czas podwojenia
- ok. 36–48 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- TT (numer katalogowy Cytion 305027)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1774
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja białek
- Kalcytonina, antygen rakowo-płodowy (CEA)
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- Pożywka Ham's F12K, w: 2,0 mM L-glutamina, w: 2,0 mM pirogronian sodu, w: 2,5 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820608a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 1% NEAA i 1mM pirogronianu sodu
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 3
- Gęstość wysiewu
- od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Po rozmrożeniu należy wysiać komórki w gęstości 5 × 10⁴ komórek/cm² i odczekać co najmniej 24 godziny, aż komórki przylgną do podłoża, przed pierwszą wymianą pożywki. Uwaga: Osiągnięcie stabilnego poziomu wydzielania kalcytoniny może wymagać od 24 do 72 godzin po rozmrożeniu.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 77 lat
- Pochodzenie etniczne
- Europejski
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak