Przejdź do treści
TT
Chusteczka
Tarczyca, rdzeń
Choroba
Dziedziczny rak rdzeniasty tarczycy, mnoga gruczolakowatość wewnątrzwydzielnicza typu 2
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (pierwotny dziedziczny rak rdzeniasty tarczycy; brak udokumentowanych przerzutów odległych)
Synonimy
MTC-TT

Dokumenty

TT

Cell line · Numer produktu 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis
Komórki TT stale wytwarzają wysoki poziom kalcytoniny i CEA. Stwierdzono, że immunoreaktywna kalcytonina jest wytwarzana w hodowli komórkowej na poziomie 3900 pg/milion komórek i 7700 pg/milion komórek odpowiednio 24 i 72 godziny po zmianie pożywki. Stwierdzono, że CEA gromadzi się do ponad 27 ng/milion komórek w ciągu 72 godzin. Analiza chromosomalna linii komórkowej i guzów indukowanych u nagich myszy ujawnia aneuploidalny ludzki kariotyp z kilkoma chromosomami markerowymi.Wstępne badania charakterystyki linii komórkowej TT przeprowadzono przy użyciu komórek TT wczesnego pasażowania hodowanych w pożywce RPMI 1640 uzupełnionej 15% płodową surowicą bydlęcą i 1mM L-glutaminą.Nie wiadomo, czy neuropeptydy wytwarzane przez tę linię komórkową, gdy była hodowana w pożywce RPMI 1640, są również wytwarzane przez komórki, gdy są hodowane w pożywce Ham's F-12K. Analiza chromosomalna linii komórkowej i guzów indukowanych u nagich myszy ujawnia aneuploidalny ludzki kariotyp z kilkoma chromosomami markerowymi.
Chusteczka
Tarczyca, rdzeń
Choroba
Dziedziczny rak rdzeniasty tarczycy, mnoga gruczolakowatość wewnątrzwydzielnicza typu 2
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (pierwotny dziedziczny rak rdzeniasty tarczycy; brak udokumentowanych przerzutów odległych)
Zastosowania
Badania nad rakiem rdzeniastym tarczycy; biologia nowotworów neuroendokrynnych; badania nad wydzielaniem kalcytoniny; biologia zespołu MEN2; analiza szlaku protoonkogenu RET; wrażliwość na leki (kabozantynib, wandetanib, ewerolimus); badania nad biomarkerami neuroendokrynnymi; opracowywanie testów na poziom CEA
Synonimy
  • MTC-TT

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
Bez GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórki neuroendokrynne (komórki typu C / komórki parafolikularne)
Nowotworotwórczy
Tak
Czas podwojenia
ok. 36–48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
TT (numer katalogowy Cytion 305027)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Kalcytonina, antygen rakowo-płodowy (CEA)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Pożywka Ham's F12K, w: 2,0 mM L-glutamina, w: 2,0 mM pirogronian sodu, w: 2,5 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820608a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 1% NEAA i 1mM pirogronianu sodu
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu należy wysiać komórki w gęstości 5 × 10⁴ komórek/cm² i odczekać co najmniej 24 godziny, aż komórki przylgną do podłoża, przed pierwszą wymianą pożywki. Uwaga: Osiągnięcie stabilnego poziomu wydzielania kalcytoniny może wymagać od 24 do 72 godzin po rozmrożeniu.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
77 lat
Pochodzenie etniczne
Europejski