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TT
Tissue
甲狀腺,髓質
Disease
遺傳性甲狀腺髓樣癌、第二型多發性內分泌腫瘤
Metastatic site
不適用(原發性遺傳性甲狀腺髓樣癌;無確證之遠端轉移)
Synonyms
MTC-TT

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TT

Cell line · Product number 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description
TT 細胞會持續產生高濃度的降鈣素和 CEA。研究發現,在細胞培養中,更換培養基後 24 小時及 72 小時,細胞分別產生 3900 pg/百萬細胞和 7700 pg/百萬細胞的免疫反應性降鈣素。研究發現,在 72 小時內,CEA 的累積濃度可超過 27 ng/百萬細胞。對該細胞系及在裸鼠體內誘導生成的腫瘤進行染色體分析後,發現其具有非整倍體的人類核型,並含有數條標記染色體。TT 細胞系的初步特性分析研究,是使用早期傳代的 TT 細胞進行的,這些細胞在添加了 15% 胎牛血清和 1mM L-谷胺醯胺的 RPMI 1640 培養基中培養。目前尚不清楚,據報導當該細胞系在 RPMI 1640 培養基中生長時所產生的神經肽,在 Ham's F-12K 培養基中培養時是否也會由這些細胞產生。對該細胞系及在裸鼠體內誘導的腫瘤進行染色體分析後發現,其具有非整倍體的人類核型,並含有數條標記染色體。
Tissue
甲狀腺,髓質
Disease
遺傳性甲狀腺髓樣癌、第二型多發性內分泌腫瘤
Metastatic site
不適用(原發性遺傳性甲狀腺髓樣癌;無確證之遠端轉移)
Applications
甲狀腺髓樣癌研究;神經內分泌腫瘤生物學;降鈣素分泌研究;MEN2 生物學;RET 原癌基因路徑分析;藥物敏感性(卡博贊替尼、凡德他尼、依維莫司);神經內分泌生物標記研究;CEA 檢測法開發
Synonyms
  • MTC-TT

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣
Cell type
神經內分泌細胞(C細胞/旁濾泡細胞)
Tumourigenic
是的
Doubling time
約 36 至 48 小時

04Identifiers

Citation
TT(Cytion 型號 305027)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Expression and susceptibility

Protein expression
降鈣素、癌胚抗原(CEA)

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12K 中型培養基,含:2.0 mM L-谷氨醯胺、2.0 mM 丙酮酸鈉、2.5 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820608a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% FBS、1% NEAA 及 1mM 丙酮酸鈉
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Split ratio
1 至 3
Seeding density
1 至 3 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Post-thaw recovery
解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中,並在首次更換培養基前,讓細胞附著至少 24 小時。注意:甲狀旁腺激素的分泌可能需要解凍後 24 至 72 小時,才能達到穩定的分泌水平。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
77年
Ethnicity
歐洲的