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TT
Tissue
Tiroides, médula
Disease
Carcinoma medular hereditario de la glándula tiroides, neoplasia endocrina múltiple tipo 2
Metastatic site
No aplicable (carcinoma medular de tiroides hereditario primario; sin metástasis a distancia documentadas)
Synonyms
MTC-TT

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TT

Cell line · Product number 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description
Las células TT producen continuamente altos niveles de calcitonina y CEA. Se observó que, en cultivo celular, la calcitonina inmunorreactiva se producía en niveles de 3900 pg/millón de células y 7700 pg/millón de células a las 24 y 72 horas, respectivamente, después de un cambio de medio.Se observó que el CEA se acumulaba a más de 27 ng/millón de células durante un período de 72 horas. El análisis cromosómico de la línea celular y de los tumores inducidos en ratones desnudos revela un cariotipo humano aneuploide con varios cromosomas marcadores.Los estudios iniciales de caracterización de la línea celular TT se llevaron a cabo utilizando células TT de pases tempranos cultivadas en medio RPMI 1640 suplementado con un 15 % de suero fetal bovino y 1 mM de L-glutamina.Se desconoce si los neuropéptidos que, según se ha informado, produce esta línea celular cuando se cultiva en medio RPMI 1640 también son producidos por las células cuando se cultivan en medio F-12K de Ham.El análisis cromosómico de la línea celular y de los tumores inducidos en ratones desnudos revela un cariotipo humano aneuploide con varios cromosomas marcadores.
Tissue
Tiroides, médula
Disease
Carcinoma medular hereditario de la glándula tiroides, neoplasia endocrina múltiple tipo 2
Metastatic site
No aplicable (carcinoma medular de tiroides hereditario primario; sin metástasis a distancia documentadas)
Applications
Investigación sobre el carcinoma medular de tiroides; biología de los tumores neuroendocrinos; estudios sobre la secreción de calcitonina; biología del síndrome MEN2; análisis de la vía del protooncogén RET; sensibilidad a los fármacos (cabozantinib, vandetanib, everolimus); investigación sobre biomarcadores neuroendocrinos; desarrollo de ensayos de CEA
Synonyms
  • MTC-TT

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Células neuroendocrinas (células C / células parafoliculares)
Tumourigenic
Sí
Doubling time
aprox. de 36 a 48 horas

04Identifiers

Citation
TT (número de catálogo de Cytion 305027)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Expression and susceptibility

Protein expression
Calcitonina, antígeno carcinoembrionario (CEA)

06Handling and culture

Culture medium
Medio F12K de Ham, con: 2,0 mM de L-glutamina, con: 2,0 mM de piruvato de sodio, con: 2,5 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820608a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS, un 1 % de NEAA y 1 mM de piruvato de sodio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Split ratio
1 a 3
Seeding density
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Post-thaw recovery
Después de descongelar, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se adhieran durante al menos 24 horas antes del primer cambio de medio. Nota: La producción de calcitonina puede tardar entre 24 y 72 horas después de la descongelación en alcanzar niveles estables de secreción.
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
77 años
Ethnicity
Europeo