Skip to content
TT
Tissue
בלוטת התריס, מדולה
Disease
קרצינומה מדולרית תורשתית של בלוטת התריס, נאופלזיה אנדוקרינית מרובה מסוג 2
Metastatic site
לא רלוונטי (קרצינומה מדולרית תורשתית ראשונית של בלוטת התריס; אין תיעוד של גרורות מרוחקות)
Synonyms
MTC-TT

Documents

TT

Cell line · Product number 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description
תאי TT מייצרים ברציפות רמות גבוהות של קלציטונין ו-CEA. נמצא כי קלציטונין אימונו-ריאקטיבי מיוצר בתרבית תאים ברמות של 3900 pg/מיליון תאים ו-7700 pg/מיליון תאים 24 ו-72 שעות בהתאמה, לאחר החלפת המדיום. נמצא כי CEA מצטבר לרמות של מעל 27 ng/מיליון תאים במהלך תקופה של 72 שעות.ניתוח כרומוזומלי של קו התאים וגידולים שהופקו בעכברים עירומים מגלה קריוטיפ אנושי אנאופלואידי עם מספר כרומוזומים סמנים. מחקרי האפיון הראשוניים של קו התאים TT בוצעו באמצעות תאי TT במעבר מוקדם שגודלו במדיום RPMI 1640 בתוספת 15% סרום עגלי ו-1mM L-גלוטמין.לא ידוע אם הנוירופפטידים שדווח כי הם מיוצרים על ידי קו תאים זה כאשר הוא גודל במדיום RPMI 1640 מיוצרים גם על ידי התאים כאשר הם מתורבתים במדיום Ham's F-12K. ניתוח כרומוזומלי של קו התאים וגידולים שהופקו בעכברים עירומים מגלה קריוטיפ אנושי אנאופלואידי עם מספר כרומוזומים סמנים.
Tissue
בלוטת התריס, מדולה
Disease
קרצינומה מדולרית תורשתית של בלוטת התריס, נאופלזיה אנדוקרינית מרובה מסוג 2
Metastatic site
לא רלוונטי (קרצינומה מדולרית תורשתית ראשונית של בלוטת התריס; אין תיעוד של גרורות מרוחקות)
Applications
מחקר על קרצינומה מדולרית של בלוטת התריס; ביולוגיה של גידולים נוירואנדוקריניים; מחקרים על הפרשת קלציטונין; ביולוגיה של MEN2; ניתוח מסלול הפרוטו-אונקוגן RET; רגישות לתרופות (קבוזנטיניב, ונדטניב, אוורולימוס); מחקר על סמנים ביולוגיים נוירואנדוקריניים; פיתוח בדיקת CEA
Synonyms
  • MTC-TT

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאים נוירואנדוקריניים (תאי C / תאים פאראפוליקולריים)
Tumourigenic
כן
Doubling time
כ-36 עד 48 שעות

04Identifiers

Citation
TT (מספר קטלוג Cytion 305027)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Expression and susceptibility

Protein expression
קלציטונין, אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA)

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820608a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, 1% NEAA ו-1mM Sodiumpyruvat
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 3
Seeding density
1 עד 3 × 10⁴ תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, יש לשתול את התאים בצפיפות של 5 × 10⁴ תאים/סמ"ר ולהמתין לפחות 24 שעות עד להיצמדותם לפני החלפת התווך הראשונה. הערה: ייתכן שיידרשו 24–72 שעות לאחר ההפשרה עד שהפרשת הקלציטונין תגיע לרמות יציבות.
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
77 שנים
Ethnicity
אירופאי