Langsung ke isi
TT
Tisu
Tiroid, medula
Penyakit
Karsinoma meduler kelenjar tiroid herediter, Neoplasia endokrin multipel tipe 2
Lokasi metastasis
Tidak berlaku (karsinoma meduler tiroid herediter primer; tidak ada metastasis jauh yang tercatat)
Sinonim
MTC-TT

Dokumen

TT

Cell line · Nomor produk 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi
Kalsitonin imunoreaktif ditemukan diproduksi dalam kultur sel pada tingkat 3900 pg/juta sel dan 7700 pg/juta sel masing-masing selama 24 dan 72 jam, setelah penggantian media, CEA ditemukan terakumulasi hingga lebih dari 27 ng/juta sel selama periode 72 jam Analisis kromosom dari garis sel dan tumor yang diinduksi pada tikus telanjang menunjukkan kariotipe manusia aneuploid dengan beberapa kromosom penanda.Studi karakterisasi awal dari garis sel TT dilakukan dengan menggunakan sel TT bagian awal yang dibudidayakan dalam media RPMI 1640 yang dilengkapi dengan 15% serum sapi janin dan 1mM L-glutamin.Tidak diketahui apakah neuropeptida yang dilaporkan diproduksi oleh garis sel ini ketika ditumbuhkan dalam media RPMI 1640 juga diproduksi oleh sel ketika dikultur dalam media Ham's F-12K Analisis kromosom dari garis sel dan tumor yang diinduksi pada tikus telanjang mengungkapkan kariotipe manusia aneuploid dengan beberapa kromosom penanda.
Tisu
Tiroid, medula
Penyakit
Karsinoma meduler kelenjar tiroid herediter, Neoplasia endokrin multipel tipe 2
Lokasi metastasis
Tidak berlaku (karsinoma meduler tiroid herediter primer; tidak ada metastasis jauh yang tercatat)
Aplikasi
Penelitian karsinoma meduler tiroid; biologi tumor neuroendokrin; studi sekresi kalsitonin; biologi MEN2; analisis jalur proto-onkogen RET; sensitivitas terhadap obat (cabozantinib, vandetanib, everolimus); penelitian biomarker neuroendokrin; pengembangan uji CEA
Sinonim
  • MTC-TT

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
Bebas Transgenik
Rincian status GMO
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Jenis sel
Sel neuroendokrin (sel C / sel parafollikular)
Tumorigenik
Ya
Waktu penggandaan
sekitar 36 hingga 48 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
TT (nomor katalog Cytion 305027)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
Kalsitonin, Antigen Karsinoembrionik (CEA)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamine, w: 2,0 mM Sodium piruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820608a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS, 1% NEAA dan 1mM Sodiumpyruvat
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Rasio pemisahan
1 sampai 3
Kepadatan penanaman
1 hingga 3 × 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah pencairan, tanam sel pada kepadatan 5 × 10⁴ sel/cm² dan biarkan setidaknya selama 24 jam agar sel menempel sebelum penggantian medium pertama. Catatan: Produksi kalsitonin mungkin memerlukan waktu 24–72 jam setelah pencairan sebelum mencapai tingkat sekresi yang stabil.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
77 tahun
Etnis
Eropa