الانتقال إلى المحتوى
TT
الأنسجة
الغدة الدرقية، النخاع
المرض
سرطان الغدة الدرقية النخاعي الوراثي، سرطان الغدة الدرقية النخاعي الوراثي، ورم الغدد الصماء المتعدد من النوع 2
موقع الانتشار
لا ينطبق (سرطان الغدة الدرقية النخاعي الوراثي الأولي؛ لا توجد حالات ورم خبيث بعيد موثقة)
المرادفات
MTC-TT

المستندات

TT

Cell line · رقم المنتج 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف
تنتج خلايا TTT بشكل مستمر مستويات عالية من الكالسيتونين و CEA، وقد وُجد أن الكالسيتونين التفاعلي المناعي ينتج في مزرعة الخلية بمستويات 3900 بيكوغرام/مليون خلية و7700 بيكوغرام/مليون خلية بعد 24 و72 ساعة على التوالي بعد تغيير الوسط، كما وُجد أن CEA يتراكم إلى أكثر من 27 نانوغرام/مليون خلية على مدار 72 ساعة، ويكشف التحليل الكروموسومي لخط الخلايا والأورام المستحثة في الفئران العارية عن نمط نووي بشري مختلط الصبغيات مع العديد من الكروموسومات المميزة.أُجريت دراسات التوصيف الأولية لخط خلايا TT باستخدام خلايا TT في مرحلة مبكرة من مرورها مزروعة في وسط RPMI 1640 مضاف إليه 15% مصل بقري جنيني و1 ملي مولار جلوتامين.من غير المعروف ما إذا كانت الببتيدات العصبية التي تم الإبلاغ عن إنتاجها من قبل هذا الخط الخلوي عندما نمت في وسط RPMI 1640 يتم إنتاجها أيضًا من قبل الخلايا عندما يتم زراعتها في وسط هام F-12K.
الأنسجة
الغدة الدرقية، النخاع
المرض
سرطان الغدة الدرقية النخاعي الوراثي، سرطان الغدة الدرقية النخاعي الوراثي، ورم الغدد الصماء المتعدد من النوع 2
موقع الانتشار
لا ينطبق (سرطان الغدة الدرقية النخاعي الوراثي الأولي؛ لا توجد حالات ورم خبيث بعيد موثقة)
التطبيقات
أبحاث سرطان الغدة الدرقية النخاعي؛ بيولوجيا الأورام العصبية الصماء؛ دراسات إفراز الكالسيتونين؛ بيولوجيا متلازمة MEN2؛ تحليل مسار الجين الأولي المسرطن RET؛ حساسية الأدوية (كابوزانتينيب، فانديتانيب، إيفيروليموس)؛ أبحاث المؤشرات الحيوية العصبية الصماء؛ تطوير اختبار CEA
المرادفات
  • MTC-TT

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الخلايا العصبية الصماء (الخلايا C / الخلايا شبه الجريبية)
مُسبِّب للأورام
نعم
زمن المضاعفة
حوالي 36 إلى 48 ساعة

04المعرّفات

المرجع
TT (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305027)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1774

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
الكالسيتونين، المستضد الكارسينومبريوني (CEA)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
وسط هامز F12K، ث: 2.0 ملي مولار من الجلوتامين، ث: 2.0 ملي مولار من بيروفات الصوديوم، ث: 2.5 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820608 أ)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ FBS، و1٪ NEAA و1 ملي مولار من الصوديومبيريفات
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 3
كثافة البذر
من 1 إلى 3 × 10⁴ خلية/سم²
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد إذابة الثلج، قم بزرع الخلايا بكثافة 5 × 10⁴ خلية/سم² واتركها لمدة 24 ساعة على الأقل حتى تلتصق بالسطح قبل إجراء أول تغيير للوسط. ملاحظة: قد يستغرق إنتاج الكالسيتونين ما بين 24 و72 ساعة بعد إذابة الثلج قبل الوصول إلى مستويات إفراز مستقرة.
إذابة الثلج والزراعة

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
77 سنة
الأصل العرقي
أوروبي