Přejít na obsah
TT
Tkáň
Štítná žláza, dřeň
Nemoc
Hereditární medulární karcinom štítné žlázy, mnohočetná endokrinní neoplazie typu 2
Místo metastázy
Neplatí (primární hereditární medulární karcinom štítné žlázy; žádné zdokumentované vzdálené metastázy)
Synonyma
MTC-TT

Dokumenty

TT

Cell line · Číslo výrobku 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis
TT buňky kontinuálně produkují vysoké hladiny kalcitoninu a CEA.Bylo zjištěno, že imunoreaktivní kalcitonin je v buněčné kultuře produkován v množství 3900 pg/milion buněk a 7700 pg/milion buněk 24 a 72 hodin po výměně média.Bylo zjištěno, že CEA se během 72 hodin nahromadí na více než 27 ng/milion buněk.Chromozomální analýza buněčné linie a nádorů indukovaných u nahých myší ukazuje aneuploidní lidský karyotyp s několika markerovými chromozomy.Počáteční charakterizační studie buněčné linie TT byly provedeny s použitím buněk TT v rané pasáži kultivovaných v médiu RPMI 1640 doplněném 15% fetálním hovězím sérem a 1mM L-glutaminem.Není známo, zda neuropeptidy, o nichž se uvádí, že je tato buněčná linie produkuje, když byla kultivována v médiu RPMI 1640, jsou buňkami produkovány také, když jsou kultivovány v médiu Ham's F-12K. Chromozomální analýza buněčné linie a nádorů vyvolaných u nahých myší ukazuje aneuploidní lidský karyotyp s několika markerovými chromozomy.
Tkáň
Štítná žláza, dřeň
Nemoc
Hereditární medulární karcinom štítné žlázy, mnohočetná endokrinní neoplazie typu 2
Místo metastázy
Neplatí (primární hereditární medulární karcinom štítné žlázy; žádné zdokumentované vzdálené metastázy)
Aplikace
Výzkum medulárního karcinomu štítné žlázy; biologie neuroendokrinních nádorů; studie sekrece kalcitoninu; biologie MEN2; analýza signální dráhy protoonkogenu RET; citlivost na léky (kabozantinib, vandetanib, everolimus); výzkum neuroendokrinních biomarkerů; vývoj testů na CEA
Synonyma
  • MTC-TT

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Neuroendokrinní buňky (C-buňky / parafollikulární buňky)
Tumorogenní
Ano
Doba zdvojnásobení
přibližně 36 až 48 hodin

04Identifikátory

Citace
TT (katalogové číslo Cytion 305027)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Kalcitonin, karcinoembryonální antigen(CEA)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Pyruvát sodný, w: 2,5 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820608a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS, 1% NEAA a 1mM sodiumpyruvát
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky na kultivační misky v hustotě 5 × 10⁴ buněk/cm² a před první výměnou média vyčkejte alespoň 24 hodin, aby se buňky přichytily. Poznámka: K dosažení stabilní úrovně sekrece kalcitoninu může být zapotřebí 24–72 hodin po rozmrazení.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
77 let
Etnická příslušnost
Evropská