- Tkivo
- Ščitnica, medula
- Bolezen
- Dedni medularni karcinom ščitnice, multipla endokrina neoplazija tipa 2
- Mesto metastaze
- Ne velja (primarni dedni medularni karcinom ščitnice; ni dokumentiranih oddaljenih metastaz)
- Sinonimi
- MTC-TT
Dokumenti
TT
Cell line · Številka izdelka 305027
TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...
Prilagajanje / Priporočila
- TTCell line€430.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
- Celice TT nenehno proizvajajo visoke ravni kalcitonina in CEA.Ugotovljeno je bilo, da se v celični kulturi po 24 oziroma 72 urah po menjavi gojišča proizvaja imunoreaktivni kalcitonin na ravni 3900 pg/milijon celic in 7700 pg/milijon celic.CEA se v 72 urah kopiči na več kot 27 ng/milijon celic.Kromosomska analiza celične linije in tumorjev, povzročenih pri golih miših, kaže aneuploidni človeški kariotip z več označevalnimi kromosomi.Začetne študije karakterizacije celične linije TT so bile izvedene z uporabo zgodnjih celic TT, gojenih v gojišču RPMI 1640, dopolnjenem s 15 % fetalnega govejega seruma in 1 mM L-glutamina.Ni znano, ali nevropeptide, ki naj bi jih ta celična linija proizvajala pri gojenju v gojišču RPMI 1640, celice proizvajajo tudi pri gojenju v gojišču Ham's F-12K.Kromosomska analiza celične linije in tumorjev, povzročenih pri golih miših, kaže aneuploidni človeški kariotip z več označevalnimi kromosomi.
- Tkivo
- Ščitnica, medula
- Bolezen
- Dedni medularni karcinom ščitnice, multipla endokrina neoplazija tipa 2
- Mesto metastaze
- Ne velja (primarni dedni medularni karcinom ščitnice; ni dokumentiranih oddaljenih metastaz)
- Uporaba
- Raziskave medularnega karcinoma ščitnice; biologija nevroendokrinih tumorjev; študije izločanja kalcitonina; biologija sindroma MEN2; analiza poti protoonkogena RET; občutljivost na zdravila (kabozantinib, vandetanib, everolimus); raziskave nevroendokrinih biomarkerjev; razvoj testa za CEA
- Sinonimi
- MTC-TT
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Status GSO
- Brez gensko spremenjenih organizmov
- Podrobnosti o statusu GSO
- No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijam podobni
- Vrsta celice
- Nevroendokrine celice (C-celice / parafolikularne celice)
- Tumorigeničen
- Da
- Čas podvojitve
- približno 36 do 48 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- TT (kataloška številka Cytion 305027)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1774
05Izražanje in dovzetnost
- Ekspresija beljakovin
- Kalcitonin, karcinoembrionalni antigen (CEA)
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-glutamin, w: 2,0 mM natrijev piruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820608a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 1 % NEAA in 1 mM natrijevega piruvata
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Razmerje delitve
- 1 do 3
- Gostota setve
- 1 do 3 × 10⁴ celic/cm²
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Obnova po odtaljevanju
- Po odmrznitvi celice posadite v gostoti 5 × 10⁴ celic/cm² in jim pred prvo zamenjavo gojišča pustite vsaj 24 ur časa za prirast. Opomba: Proizvodnja kalcitonina lahko traja 24–72 ur po odmrznitvi, preden se dosežejo stabilne ravni izločanja.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- 77 let
- Etnična pripadnost
- Evropski
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da