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TT
Tessuto
Tiroide, midollo allungato
Malattia
Carcinoma midollare ereditario della ghiandola tiroidea, Neoplasia endocrina multipla di tipo 2
Sito metastatico
Non applicabile (carcinoma midollare della tiroide ereditario primario; nessuna metastasi a distanza documentata)
Sinonimi
MTC-TT

Documenti

TT

Cell line · Codice prodotto 305027

TT cells continuously produce high levels of calcitonin and CEA.Immunoreactive calcitonin was found to be produced in cell culture at levels of 3900 pg/milli...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione
Le cellule TT producono continuamente alti livelli di calcitonina e CEA. La calcitonina immunoreattiva è stata prodotta nella coltura cellulare a livelli di 3900 pg/milioni di cellule e 7700 pg/milioni di cellule rispettivamente 24 e 72 ore dopo un cambio di terreno. Il CEA è stato riscontrato accumularsi a più di 27 ng/milioni di cellule nell'arco di 72 ore. L'analisi cromosomica della linea cellulare e dei tumori indotti in topi nudi rivela un cariotipo umano aneuploide con diversi cromosomi marcatori.Gli studi iniziali di caratterizzazione della linea cellulare TT sono stati condotti utilizzando cellule TT di primo passaggio coltivate in terreno RPMI 1640 integrato con il 15% di siero fetale bovino e 1mM di L-glutammina.Non è noto se i neuropeptidi di cui è stata segnalata la produzione da parte di questa linea cellulare quando è stata coltivata in terreno RPMI 1640 siano prodotti dalle cellule anche quando sono coltivate in terreno Ham's F-12K. L'analisi cromosomica della linea cellulare e dei tumori indotti in topi nudi rivela un cariotipo umano aneuploide con diversi cromosomi marcatori.
Tessuto
Tiroide, midollo allungato
Malattia
Carcinoma midollare ereditario della ghiandola tiroidea, Neoplasia endocrina multipla di tipo 2
Sito metastatico
Non applicabile (carcinoma midollare della tiroide ereditario primario; nessuna metastasi a distanza documentata)
Applicazioni
Ricerca sul carcinoma midollare della tiroide; biologia dei tumori neuroendocrini; studi sulla secrezione di calcitonina; biologia della MEN2; analisi della via del proto-oncogene RET; sensibilità ai farmaci (cabozantinib, vandetanib, everolimus); ricerca sui biomarcatori neuroendocrini; sviluppo di test per il CEA
Sinonimi
  • MTC-TT

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
Senza OGM
Dettagli sullo stato degli OGM
No genetic modification; wildtype hereditary medullary thyroid carcinoma cell line
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellule neuroendocrine (cellule C / cellule parafollicolari)
Tumorigenico
Sì
Tempo di raddoppio
circa da 36 a 48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
TT (numero di catalogo Cytion 305027)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1774

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Calcitonina, Antigene Carcinoembrionale (CEA)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutammina, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,5 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820608a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS, l'1% di NEAA e 1mM di Sodiopiruvato
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
da 1 a 3 × 10⁴ cellule/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, seminare le cellule a una densità di 5 × 10⁴ cellule/cm² e attendere almeno 24 ore affinché aderiscano prima di effettuare il primo cambio di terreno di coltura. Nota: la produzione di calcitonina potrebbe richiedere 24–72 ore dopo lo scongelamento prima di raggiungere livelli di secrezione stabili.
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
77 anni
Etnia
Europeo