MDCK-SIAT1

MDCK-SIAT1 ląstelių linija yra modifikuota Madin-Darby šunų inkstų (MDCK) ląstelių versija, sukurta taip, kad būtų išreikštas didesnis žmogaus 2,6-sialiltransferazės (SIAT1) kiekis. Šis fermentas atsakingas už sialo rūgšties pridėjimą alfa-2,6 jungtimi prie galaktozės glikoproteinuose ir glikolipiduose. Modifikacija buvo atlikta siekiant padidinti alfa-2,6 junginių sialo rūgščių, kurios yra pagrindiniai žmogaus gripo virusų receptoriai, raišką. Šis padidinimas yra labai svarbus, nes MDCK-SIAT1 ląstelės tampa panašesnės į žmogaus kvėpavimo takų epitelį, kuriame natūraliai yra didelė šių receptorių koncentracija. Todėl šios ląstelės yra fiziologiškai tinkamesnis modelis žmogaus gripo virusams ir jų sąveikai su potencialiais antivirusiniais junginiais tirti.

Vienas iš svarbių MDCK-SIAT1 ląstelių pritaikymo būdų yra gripo viruso jautrumo neuraminidazės inhibitoriams (NAI), tokiems kaip oseltamiviras, vertinimas. Dėl padidėjusio alfa-2,6 silicio rūgščių kiekio MDCK-SIAT1 ląstelės pasižymi geresniu jautrumu NAI, palyginti su nemodifikuotomis MDCK ląstelėmis. Dėl to jos yra puiki priemonė atsparumui šiems inhibitoriams nustatyti, ypač žmogaus gripo virusų klinikiniuose izoliatuose su mažu praėjimo skaičiumi. MDCK-SIAT1 ląstelių linija leidžia atlikti tikslesnius vaistų veiksmingumo ir viruso receptorių sąveikos tyrimus in vitro, todėl galima gauti vertingų įžvalgų apie antivirusinės terapijos ir atsparumo mechanizmų kūrimą.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime