MDCK-SIAT1

La línea celular MDCK-SIAT1 es una versión modificada de las células del riñón canino Madin-Darby (MDCK), diseñada para expresar niveles más altos de 2,6-sialiltransferasa humana (SIAT1). Esta enzima es responsable de la adición de ácido siálico en un enlace alfa-2,6 a la galactosa en glicoproteínas y glicolípidos. La modificación se realizó para aumentar la expresión de ácidos siálicos enlazados alfa-2,6, que son los receptores primarios de los virus de la gripe humana. Esta mejora es fundamental, ya que hace que las células MDCK-SIAT1 se parezcan más al epitelio de las vías respiratorias humanas, que naturalmente tiene una alta concentración de estos receptores. Como resultado, estas células ofrecen un modelo fisiológicamente más relevante para estudiar los virus de la gripe humana y sus interacciones con posibles compuestos antivirales.

Una de las aplicaciones significativas de las células MDCK-SIAT1 es la evaluación de la sensibilidad del virus de la gripe a los inhibidores de la neuraminidasa (NAI), como el oseltamivir. Debido a la mayor presencia de ácidos siálicos enlazados alfa-2,6, las células MDCK-SIAT1 demuestran una mayor sensibilidad a los NAI en comparación con las células MDCK no modificadas. Esto las convierte en una herramienta excelente para detectar la resistencia a estos inhibidores, especialmente en aislados clínicos de virus de la gripe humana con bajo número de pasajes. La línea celular MDCK-SIAT1 permite realizar estudios in vitro más precisos de la eficacia de los fármacos y de las interacciones de los receptores virales, proporcionando valiosos conocimientos sobre el desarrollo de terapias antivirales y mecanismos de resistencia.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía