MDCK-SIAT1

إن خط خلايا MDCK-SIAT1 هو نسخة معدلة من خلايا كلى مادن داربي كانين (MDCK)، تم تصميمه هندسيًا للتعبير عن مستويات أعلى من 2،6-سياليل ترانسفيراز (SIAT1) البشري. هذا الإنزيم هو المسؤول عن إضافة حمض السياليك في ارتباط ألفا 2،6-سياليل ترانزفيراز إلى الجالاكتوز على البروتينات السكرية والجليكوليبيدات. وقد أُجري هذا التعديل لزيادة التعبير عن أحماض السياليك المرتبطة بأحماض ألفا-2،6 وهي المستقبلات الأساسية لفيروسات الإنفلونزا البشرية. ويُعد هذا التحسين أمرًا بالغ الأهمية لأنه يجعل خلايا MDCK-SIAT1 أكثر تشابهًا مع ظهارة مجرى الهواء البشري، والتي تحتوي بشكل طبيعي على تركيز عالٍ من هذه المستقبلات. ونتيجة لذلك، توفر هذه الخلايا نموذجًا أكثر ملاءمة من الناحية الفسيولوجية لدراسة فيروسات الإنفلونزا البشرية وتفاعلاتها مع المركبات المحتملة المضادة للفيروسات.

يتمثل أحد التطبيقات المهمة لخلايا MDCK-SIAT1 في تقييم حساسية فيروس الإنفلونزا لمثبطات النورامينيداز (NAIs)، مثل أوسيلتاميفير. ونظرًا لزيادة وجود أحماض السياليك المرتبطة بأحماض ألفا 2،6، تُظهر خلايا MDCK-SIAT1 حساسية محسنة لمثبطات إنزيمات الأنفلونزا العصبية مقارنة بخلايا MDCK غير المعدلة. وهذا يجعلها أداة ممتازة للكشف عن مقاومة هذه المثبطات، خاصةً في العزلات السريرية منخفضة العدد لفيروسات الأنفلونزا البشرية. يسمح خط خلايا MDCK-SIAT1 بإجراء دراسات مختبرية أكثر دقة لفعالية الدواء وتفاعلات المستقبلات الفيروسية في المختبر، مما يوفر رؤى قيمة في تطوير العلاجات المضادة للفيروسات وآليات المقاومة.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان