MDCK-SIAT1

MDCK-SIAT1 rakuliin on Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) rakkude modifitseeritud versioon, mis on loodud inimese 2,6-sitalüültransferaasi (SIAT1) kõrgema taseme ekspresseerimiseks. See ensüüm vastutab siaalhappe liitumise eest alfa-2,6 sidemetega galaktoosile glükoproteiinidel ja glükolipiididel. Modifikatsioon viidi läbi, et suurendada alfa-2,6-ühendatud siaalhapete ekspressiooni, mis on inimese gripiviiruste esmased retseptorid. See suurendamine on oluline, sest see muudab MDCK-SIAT1 rakud sarnasemaks inimese hingamisteede epiteelile, kus on looduslikult suur kontsentratsioon neid retseptoreid. Selle tulemusena pakuvad need rakud füsioloogiliselt asjakohasemat mudelit inimese gripiviiruste ja nende koostoimete uurimiseks võimalike viirusevastaste ühenditega.

MDCK-SIAT1 rakkude üks olulisi rakendusi on gripiviiruse tundlikkuse hindamine neuraminidaasi inhibiitorite (NAI), näiteks oseltamiviiri suhtes. Tänu alfa-2,6-ühendatud siaalhapete suurenenud sisaldusele on MDCK-SIAT1 rakud võrreldes modifitseerimata MDCK rakkudega tundlikumad NAI-de suhtes. See muudab nad suurepäraseks vahendiks nende inhibiitorite suhtes resistentsuse tuvastamiseks, eriti inimeste gripiviiruste kliiniliste isolaatide madala läbilaskevõimega isolaatides. MDCK-SIAT1 rakuliin võimaldab täpsemaid in vitro uuringuid ravimite tõhususe ja viiruse retseptorite koostoimete kohta, andes väärtuslikke teadmisi viirusevastaste ravimeetodite ja resistentsuse mehhanismide väljatöötamise kohta.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest