MDCK-SIAT1

Bei der MDCK-SIAT1-Zelllinie handelt es sich um eine modifizierte Version der Madin-Darby Canine Kidney (MDCK)-Zellen, die so verändert wurde, dass sie eine höhere Expression der menschlichen 2,6-Sialyltransferase (SIAT1) aufweist. Dieses Enzym ist für die Anlagerung von Sialinsäure in einer alpha-2,6-Bindung an Galaktose auf Glykoproteinen und Glykolipiden verantwortlich. Die Veränderung wurde durchgeführt, um die Expression von alpha-2,6-verknüpften Sialinsäuren zu erhöhen, die die primären Rezeptoren für menschliche Influenzaviren sind. Diese Verstärkung ist von entscheidender Bedeutung, da sie die MDCK-SIAT1-Zellen dem menschlichen Atemwegsepithel ähnlicher macht, das von Natur aus eine hohe Konzentration dieser Rezeptoren aufweist. Daher bieten diese Zellen ein physiologisch relevanteres Modell für die Untersuchung menschlicher Influenzaviren und ihrer Wechselwirkungen mit potenziellen antiviralen Wirkstoffen.

Eine der wichtigsten Anwendungen von MDCK-SIAT1-Zellen ist die Bewertung der Empfindlichkeit von Influenzaviren gegenüber Neuraminidase-Inhibitoren (NAI), wie Oseltamivir. Aufgrund des erhöhten Vorkommens von alpha-2,6-verknüpften Sialinsäuren zeigen die MDCK-SIAT1-Zellen im Vergleich zu unveränderten MDCK-Zellen eine verbesserte Empfindlichkeit gegenüber NAIs. Dies macht sie zu einem ausgezeichneten Instrument für den Nachweis von Resistenzen gegen diese Inhibitoren, insbesondere bei klinischen Isolaten humaner Influenzaviren mit geringer Durchgangszahl. Die MDCK-SIAT1-Zelllinie ermöglicht genauere In-vitro-Untersuchungen der Wirksamkeit von Arzneimitteln und der Wechselwirkungen mit viralen Rezeptoren, was wertvolle Einblicke in die Entwicklung antiviraler Therapien und Resistenzmechanismen ermöglicht.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung