MDCK-SIAT1

MDCK-SIAT1細胞株は、Madin-Darby Canine Kidney (MDCK)細胞を改良したもので、ヒト2,6-シアル酸転移酵素(SIAT1)を高レベルで発現するように操作されている。この酵素は糖タンパク質や糖脂質上のガラクトースにα-2,6結合でシアル酸を付加する役割を担っている。この修飾は、ヒトインフルエンザウイルスの主要な受容体であるα-2,6結合シアル酸の発現を増加させるために行われた。この増強は、MDCK-SIAT1細胞を、もともとこれらのレセプターを高濃度に持つヒト気道上皮により近づけるという意味で重要である。その結果、これらの細胞は、ヒトインフルエンザウイルスとその潜在的な抗ウイルス化合物との相互作用を研究するための、より生理学的に適切なモデルとなる。

MDCK-SIAT1細胞の重要な応用例の一つは、オセルタミビルなどのノイラミニダーゼ阻害剤（NAI）に対するインフルエンザウイルスの感受性の評価である。α-2,6結合シアル酸の存在量が増加するため、MDCK-SIAT1細胞は、修飾されていないMDCK細胞と比較して、NAIに対する感受性が向上している。このことは、特に通過数の少ないヒトインフルエンザウイルスの臨床分離株において、これらの阻害剤に対する耐性を検出するための優れたツールとなる。MDCK-SIAT1細胞株は、薬剤の有効性とウイルスレセプターの相互作用をより正確にin vitroで研究することを可能にし、抗ウイルス療法の開発と耐性メカニズムに関する貴重な知見を提供する。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。