MDCK-SIAT1
Cell line · Termékszám 602281
Az MDCK-SIAT1 sejtvonal a Madin-Darby kutyavese (MDCK) sejtek módosított változata, amelyet úgy alakítottak ki, hogy nagyobb mennyiségben fejezze ki az emberi 2,6-sialiltransz…
Személyre szabás / Ajánlások
- MDCK-SIAT1Cell line€430.00
01Általános információk
- Leírás
Az MDCK-SIAT1 sejtvonal a Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) sejtek módosított változata, amelyet úgy alakítottak ki, hogy nagyobb mértékben expresszálja a humán 2,6-szialiltranszferázt (SIAT1). Ez az enzim felelős a szialinsav alfa-2,6 kötésben történő galaktózhoz való hozzáadásáért a glikoproteineken és glikolipideken. A módosítást azért végezték, hogy növeljék az alfa-2,6 kötésű sziálsavak expresszióját, amelyek a humán influenzavírusok elsődleges receptorai. Ez a fokozás kritikus jelentőségű, mivel az MDCK-SIAT1 sejteket hasonlóbbá teszi a humán légúti epitéliumhoz, amely természetes módon nagy koncentrációban tartalmazza ezeket a receptorokat. Ennek eredményeként ezek a sejtek fiziológiailag relevánsabb modellt kínálnak a humán influenzavírusok és a potenciális antivirális vegyületekkel való kölcsönhatásaik tanulmányozásához.
Az MDCK-SIAT1 sejtek egyik jelentős alkalmazása az influenzavírus neuraminidáz-gátlókkal (NAI), például az oseltamivirrel szembeni érzékenységének felmérése. Az alfa-2,6 kötésű sziálsavak fokozott jelenléte miatt az MDCK-SIAT1 sejtek jobb érzékenységet mutatnak a NAI-kkal szemben, mint a nem módosított MDCK sejtek. Ezáltal kiváló eszközzé válnak az ilyen inhibitorokkal szembeni rezisztencia kimutatására, különösen a humán influenzavírusok alacsony átjárási számú klinikai izolátumaiban. Az MDCK-SIAT1 sejtvonal lehetővé teszi a gyógyszerek hatékonyságának és a vírusreceptorok kölcsönhatásainak pontosabb in vitro vizsgálatát, értékes betekintést nyújtva a vírusellenes terápiák és a rezisztencia mechanizmusainak fejlesztésébe.
- Szövet
- Vese
02Osztályozás
- Organizmus
- Kutya
- Szex
- Nő
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-S1
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- GMO-S1: This canine epithelial kidney cell line (MDCK-SIAT1) contains a pcDNA3.1GS construct encoding human 2,6-sialyltransferase (SIAT1), enabling expression of human-like sialylation patterns. The insert is stably present in MDCK cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biológiai biztonsági szint
- 2
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelialis
- Kettőzési idő
- 21-31 óra
04Azonosítók
- Hivatkozás
- MDCK-SIAT1 (Cytion katalógusszám 602281)
- NCBI adóazonosító szám
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_Z936
05Kifejeződés és fogékonyság
- Fehérjeexpresszió
- ST6 béta-galaktozid-alfa-2,6-szalil-transzferáz 1 (ST6GAL1, SIAT1) transzfektálták
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel és 1 mg/ml G418-mal
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Ültetési sűrűség
- 2–4 x 104 sejt/cm2
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Faj / alfaj
- Cocker spániel
- Az adományozó életkora
- Felnőtt
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Jogi nyilatkozat
- Sejtjeinket kizárólag in vitro laboratóriumi kutatási célokra bocsátjuk rendelkezésre, és nem szánjuk klinikai vagy diagnosztikai felhasználásra, nem adhatóak be embereknek, és nem használhatók fel állatorvosi célokra. A felhasználóknak be kell tartaniuk a sejtek kutatási környezetben történő kezelésére és felhasználására vonatkozó valamennyi vonatkozó irányelvet és előírást.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen