MDCK-SIAT1

Dòng tế bào MDCK-SIAT1 là phiên bản được biến đổi của dòng tế bào thận chó Madin-Darby (MDCK), được thiết kế để biểu hiện mức độ cao hơn của enzym 2,6-sialyltransferase (SIAT1) của người. Enzym này chịu trách nhiệm cho việc gắn axit sialic theo liên kết alpha-2,6 vào galactose trên các glycoprotein và glycolipid. Sự biến đổi này được thực hiện để tăng cường biểu hiện của axit sialic liên kết alpha-2,6, vốn là các thụ thể chính cho virus cúm người. Sự cải tiến này rất quan trọng vì nó làm cho các tế bào MDCK-SIAT1 trở nên tương tự hơn với biểu mô đường hô hấp của người, vốn có nồng độ cao các thụ thể này. Do đó, các tế bào này cung cấp một mô hình sinh lý học phù hợp hơn để nghiên cứu virus cúm người và tương tác của chúng với các hợp chất kháng virus tiềm năng.

Một trong những ứng dụng quan trọng của tế bào MDCK-SIAT1 là đánh giá độ nhạy cảm của virus cúm đối với các chất ức chế neuraminidase (NAIs), như oseltamivir. Do sự gia tăng nồng độ axit sialic liên kết alpha-2,6, tế bào MDCK-SIAT1 thể hiện độ nhạy cảm cao hơn với NAIs so với tế bào MDCK chưa được sửa đổi. Điều này khiến chúng trở thành công cụ tuyệt vời để phát hiện kháng thuốc đối với các chất ức chế này, đặc biệt là trong các chủng virus cúm người có số lần truyền thấp. Dòng tế bào MDCK-SIAT1 cho phép thực hiện các nghiên cứu in vitro chính xác hơn về hiệu quả thuốc và tương tác thụ thể virus, cung cấp những hiểu biết quý giá về phát triển liệu pháp kháng virus và cơ chế kháng thuốc.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.